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《2.2.1动物细胞培养和核移植技术》导学案.doc
2.2 动物细胞工程
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
学习目标
1.简述动物细胞培养的过程、条件。
2.举例说明动物细胞培养的应用。
3.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
4.了解体细胞核移植技术的应用前景。
预习案
一、动物细胞工程
1.常用的技术手段:① 动物细胞培养 、动物细胞核移植、② 动物细胞融合 、单克隆抗体的制备等。?
2.技术基础:③ 动物细胞培养 。?
二、动物细胞培养
1.概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成④ 单个细胞 ,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。?
2.过程
取动物组织块
↓
分散组织细胞:剪碎和用⑤ 胰蛋白酶 或胶原蛋白酶处理一段时间?
↓
配制细胞悬浮液
↓
原代培养:具有贴壁生长和接触抑制的特点
↓
传代培养
3.条件
(1)⑦ 无菌 、⑧ 无毒 的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理。?
(2)营养:合成培养基中要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等;通常还需加入⑨ 血清 、血浆等。?
(3)温度和pH
a.适宜的温度:⑩ 36.5 ±0.5 ℃;?
b.适宜的pH:7.2~7.4。
(4)气体环境:主要是O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2主要维持 培养液的pH 。?4.应用
(1)生产生物制品:如病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体 等。?
(2)应用于基因工程: 动物细胞 是基因工程技术中常用的受体细胞,因此,基因工程离不开动物细胞培养。?
(3)检测 有毒物质 ,判断某种物质的毒性。?
三、动物细胞核移植技术
1.理论基础:动物的细胞核具有 全能性 。?
2.概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入去核的 卵母 细胞中,使其重组并发育成一个 新的胚胎 ,最终发育为动物个体。?
3.分类:包括 胚胎细胞核移植 和 体细胞核移植 。?
4.过程:将供体细胞注入去核卵母细胞(核移植)→通过电刺激使两细胞融合, 供体核 进入受体卵母细胞,构建重组胚胎→将胚胎移入 代孕受体 体内→生出与 供体 遗传物质基本相同的个体。?
5.应用前景
(1)畜牧生产中:加速家畜 遗传改良 进程,促进 优良畜群繁育 。?
(2)保护濒危物种方面:增加动物的 存活数量 。?
(3)医药卫生领域:转基因克隆动物作为 生物反应器 ,生产医用蛋白。?
(4)治疗人类疾病:转基因克隆动物细胞、组织和器官作为 异种移植 的供体等。?
重难点合作探究
知识点一:理解动物细胞培养的过程
1.动物细胞培养的原理是什么?
2.幼龄动物与老龄动物的组织细胞比较,分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较,哪一种更易于培养?为什么?
3.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?
4.为什么动物细胞要分散成单个细胞培养?什么是细胞贴壁和细胞的接触抑制?
5.为什么进行动物细胞培养时,通常要添加血清?
知识点二:比较动物细胞培养与植物组织培养的异同点
补充完整下表,比较动物细胞培养与植物组织培养的异同。
植物组织培养 动物细胞培养 理论基础 培养基 固体或半固体培养基 成分 水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂 取材 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 结果 新的细胞系或细胞株,不形成个体,不体现全能性 目的 植株快速繁殖;脱毒植株的培养;人工种子;生产药物、杀虫剂等; 获得细胞或细胞产品等 相同点
知识点三:动物细胞的核移植
1.通过动物细胞核移植得到克隆动物,体现了什么原理?
2.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体细胞的核?
3.可以采用什么方法让重组细胞完成细胞分裂和发育进程?
4.克隆动物的性状与核供体生物的性状是否完全相同?为什么?
随堂练习
1.现将“细胞工程”中动植物细胞培养技术列表比较如下,你认为有错误的比较项目是( )。
比较项目 原理 培养基区别 结果 培养目的 植物组织培养 细胞的全能性 需加植物激素 培育成植株 快速繁殖,培育无病毒植株等 动物细胞培养 细胞的全能性 需加动物血清 培育成细胞系或细胞株 获得细胞或细胞产物等
A.原理 B.培养基区别 C.结果 D.培养目的
2.下列关于体细胞克隆的叙述中,错误的是( )。
A.供体是提供细胞核的体细胞
B.受体为去核卵母细胞
C.细胞核移植是体细胞克隆的关键步骤
D.克隆出的后代与供体的遗传物质和表现型完全一致
3.动物细胞培养的细胞来自于( )。
A.生物个体的任何细胞 B.只能取自动物胚胎细胞
C.只能取自幼龄动物的组织细胞 D.胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞
4.如果用动物的细胞进行克隆实验,应该选择的细胞核不能来源于( )。
A.乳腺细
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