2013年高中生物实验基础知识.docVIP

高中生物实验基础知识 实验一 观察DNA、RNA在细胞中的分布 1、实验注意事项 (1)选材：口腔上皮细胞、无色的洋葱表皮细胞，不能用紫色洋葱表皮细胞或叶肉细胞，防止颜色的干扰。 (2)缓水流冲洗目的：防止玻片上的细胞被冲走。 (3)几种试剂在实验中的作用 0.9%NaCl溶液(生理盐水)：保持口腔上皮细胞正常形态。 8%盐酸：a.改变细胞膜等的通透性；b.使染色体中DNA与蛋白质分开。 蒸馏水：a.配制染色剂；b.冲洗载玻片。 甲基绿吡罗红染液：混合使用且现配现用。 (4)DNA和RNA在细胞核和细胞质中都有分布，只是量的多少不同。故结论中强调主要而不能说只存在于细胞核或细胞质中。 实验二 (1)还原糖鉴定实验材料要求 ①浅色：不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰。 ②还原糖含量高：不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)。 (2)唯一需要加热—还原糖鉴定，且必需水浴加热，不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。 (3)非还原糖(如蔗糖)＋斐林试剂现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。 (4)唯一需要显微镜—— 脂肪鉴定，实验用50%酒精的作用——洗掉浮色。 (5)记准混合后加入—— 斐林试剂，且现配现用；分别加入——双缩脲试剂(先加A液，后加B液，且B液不能过量)。两者成分相同，但CuSO4的浓度不同，所以不能混用。 (6)若用大豆做材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其粘在试管壁上不易涮洗；且该实验应预留部分组织样液做对比。 ②、对光：扭动转换器，使镜头（低倍镜）、镜筒和通光孔成一直线；根据光线强弱，调节反光镜和遮光器（光圈） ③、放置标本：玻片标本放置要正对通光孔的中央，用压片夹固定 ④、调焦观察：转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（此时眼睛应当看到物镜镜头与标本之间，以免物镜与标本相撞）；左眼看目镜内，同时反向缓缓转动粗准焦螺旋，使镜筒上升，直到看到物象为止，在稍稍转动细准焦螺旋，使看到的物象更清晰；移动装片，在低倍镜下使需要放大观察的部分移动到视野中央；转动转换器，换成高倍物镜；缓缓调节细准焦螺旋，使物象清晰；调节光圈，使视野亮度适宜。 ⑤、善后整理：将显微镜外表擦拭干净；转动转换器，把两物镜偏到旁边，下调镜筒至最低，送回镜箱。 3、显微镜使用的注意事项： 先低后：先低倍镜后高倍镜；先放低镜筒，再向上调节（换高倍镜后只能用细准焦螺旋！）成像规律：上下、左右颠倒（如何移动玻片）变化规律：图像变大、数量减少、视野变暗 放大倍数：物x目 指的是长度上的放大倍数 高放大倍数的表现：目镜越短，物镜越长，物镜距离玻片越近（目短物长距离近） 实验 观察叶绿体实验 ①叶绿体呈绿色的椭球形或球形，不需染色，制片后直接观察。 线粒体呈无色棒状、圆球状等，用健那绿染成蓝绿色后制片观察。 ①实验过程中的临时装片要始终保持有水状态。 要漱净口腔，防止杂质对观察物像的干扰。 用菠菜叶带叶肉的下表皮的原因：靠近下表皮的叶为组织，叶绿体大而排列疏松，便于观察；带叶肉是因为表皮细胞不含叶绿体。 叶绿体在弱光下以椭球形的正面朝向光源，便于接受较多的光照；在强光下则以侧面朝向光源以避免被灼伤。 实验1．渗透系统的组成及条件 (1)半透膜可以是生物性的选择透过性膜，如细胞膜，也可以是物理性的过滤膜，如玻璃纸。 (2)半透膜两侧的溶液具有浓度差。浓度差的实质是单位体积溶液中溶质分子数的差，即物质的量浓度之差，即摩尔浓度而不是质量浓度。 2、注意事项 ①若溶质分子能通过半透膜，则先是浓度高的一侧液面升高，随后另一侧液面上升，最后达到渗透平衡。 ②图中，在达到渗透平 衡后，只要存在液面 差Δh，则S1溶液的浓度 仍大于S2溶液的浓度。 ③若S1为10%蔗糖溶液，S2为10%葡萄糖溶液(葡萄糖不能透过半透膜)，则水分子由漏斗进烧杯使漏斗液面下降。 ④水分子的移动方向：双向移动，但最终结果是单位体积内水分子数多(低浓度)溶液流向单位体积内水分子数少(高浓度)溶液。 实验 观察和复原实验 （2）实验注意事项 实验时必须用新鲜的、刚从活的动物体中取出的肝脏作实验材料。肝脏如果不新鲜，肝细胞内的过氧化氢酶等有机物就会在腐生细菌的作用下分解，使组织中酶分子的数量减少且活性降低。3、探究温度对酶活性的影响 （2）实验注意事项 ①因为过氧化氢酶的反应 底物过氧化氢受热会分解， 所以用其做温度探究的实验， 会对实验结果带来干扰。 ②因为斐林试剂在使用时需要加热，这对温度探究带来干扰，而使用碘液无需加热，对实验无干扰。 4、探究pH对酶活性的影响 思考：为什么不能用淀粉酶做探究pH的实验？ 答：因为淀粉在酸性条件下会分解，这对于判断淀粉酶能否使得淀粉水解出现干扰。故不能