Waters600型高效液相色谱仪标准操作规程.pdfVIP

Waters 600 型高效液相色谱仪 Waters 600 型高效液相色谱仪标准操作规程 1 、仪器组成及电源 1.1 仪器组成 本仪器由Waters 600 泵、Waters 486 紫外检测 器和Waters PC800 工作站组成，三个部件均有电源插头。 1.2 接通电源 将电源插头分别插入插座后，依次打开泵、检测 器、PC800 工作站的电源开关。 2 、Waters 600 泵操作 2.1 常规准备工作 包括：开通电源，溶剂脱气，泵头及溶剂管路 除空气泡及泵的起动。 2.1.1 接通系统电源，控制器开通后进行自检，数秒后通过，接受 操作指令。 2.1.2 溶剂瓶脱气 检查氦气瓶压力调节器，设定压力在 50～ 90psi 之间。按[SETUPI 调节后，按 ISOCRATIC 或 DIRECT ，在需 通气区打入初始值 100ml ／min ，用ENTER 输入，通气满 15 分钟， 再按流动相情况分别将氦气流量设定在10～30ml ／min 。 2.1.3 系统中气泡排除 泵启动时，调节所需通道流速为 lml ／ min ，该通道如 A 调节为 100％。开启溶剂排放阀用针筒抽取 10ml 溶剂，关闭排放阀。柱前气泡如不能排除，则管路在不与色谱柱连接 情况下，提高流速至9ml ／min ，数分钟后将流速减至lml ／min 。 2.2 等度(1socratic)操作 用梯度控制器上ISOCRATIC 调出等度 操作屏幕。该屏幕可以控制：(1)溶剂流量设定；送入流动相溶剂组 成；设定脱气时氦流量；设定柱加热单元的温度，控制外接继电器开 关及控制泵操作。 等度操作时需设定溶剂流量及流动相溶剂组成。后者通过光标选 择在每个流动相中打入其百分比组成，各组成之和应为 100％，设定 后用ENTER 输入。 2.3 梯度洗脱操作 梯度洗脱需要编制梯度表和程序事件 ( Program event )表后，在OPERATE GRADIENT 屏幕时运行。 2.3.1 梯度表的编制 步骤包括：(1)梯度表的设立；(2)梯度表的 输入／编辑；(3)梯度表的贮存；(4) 自动启始操作的指定及(5)删除以 前的梯度表。 2.3.1.1 梯度表的设立 在复印的梯度表中填入每梯度小段的流 速、溶剂组成及速率改变曲线(见表 1)。共可设包括开始条件在内的 14 个小段。 表1 梯度表( GRADIENT TABLE )示例 时间(TIME) 流速(FLOW) ％A ％B ％C ％D 曲线(CURVE) 开始(1NITIAL) 1.00 100 0 0 0 * 30.00 1.00 0 100 0 0 6 35.00 1.00 100 0 0 0 6 50.00 0.00 100 0 0 0 11 2.3.1.2 梯度表的输入／编辑 按照(2 ．3 ．1．1)梯度表的内容用 光标调节位置，将表号( Table# ) 及各项内容送入相应位置。流速改 变曲线分凹，凸及线性，可借助HELP 键调出有关资料参考。 编辑梯度表时删除行方法：将光标移至准备删去的行，按 CLEARLINE 。插入行时进将光标移至表末，打入时间及内容，表格 即按本身时间重排。 2.3.1.3 梯度表的贮存 可以贮存的梯度表共15个，编号为1～15。 欲贮存时按 SAVE 键、屏幕要求输入表号(1～15)，输入表号后按 ENTER 键。以前存入的程序号将被要求是否用新表取代。回答，1 ＝Yes ，0 ＝No 后即按要求处理。 2.3.1.4 自动启始操作的指定 用 PUMP SETUP 屏幕设定延迟 执行梯度时间