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口腔细菌体外模型建立的研究进展 张海诚 (好来化工(中山)有限公司广东中山528411) 摘要：简要综述口腔细菌的体外模型的研究进展。 关键词：口腔细菌；混合培养；牙菌斑 1前言 生物。后来将其命名为球菌、杆菌和螺旋体，并沿用至今。列文虎克因此被誉为口腔微生物的鼻祖，细菌学 之父。 十九世纪80年代以后，美国化学家兼牙科医师米勒(WilloughbyDayton 与微生物学的奠基人之一郭霍(Robert 微生物的研究中。此后Miller创造性的提出了龋病发生的细菌机理。即细菌发酵糖产生酸，使牙釉质脱矿 致龋，从而建立了化学——寄生物学学说。此后人们对口腔微生物的关注和研究曾停顿了一段时间，但自 上个世纪的60年代中期后，随着人们对口腔微生物的认识和研究的深入，尤其是对牙菌斑不断深入的研究 证明了：口腔微生物尤其是口腔细菌是龋病、牙周炎、牙龈炎和牙髓炎发生和发展的重要因子，使得口腔微 生物的研究又重新成为了口腔学研究的重点。 为了更好的研究口腔微生物的组成以及它们在龋病、牙周炎、牙龈炎和牙髓炎发生和发展所起的作用， 人们尝试着建立不同的模型对它们进行体外的培养和研究，从单个细菌的纯培养和研究到不同细菌的混和 培养和研究。本文简要介绍前人在口腔细菌体外模型方面所做出的探索和贡献。 2口腔致病茵的早期寻找 (1947)等研究都指出Laetobacilli尤其是Lactobaciili 起龋齿。 mutans就又引起了人们的极大的关注了。S． 人们还没有对Lactobacilli做出准确的判定前，Streptococ．cus 特征都是使它具备了很强的致龋能力。 但随着研究的不断深入，人们又发现了很多相矛盾的现象。如vail 还有Actinomyces和Bifidobacteria属的细菌也能产酸并致龋的。 随着对口腔微生物研究的迸一步深入，人们发现不能再以局部的眼光，即某类或少数几类的口腔微生 物，而应以整体的，更全面的眼光来分析和考察口腔疾病和健康。所以口腔微生物作为人体最复杂的一个 微生态系统，越来越受到人们的关注。牙菌斑(Dental phque)作为其中一个典型的微生态系统，更受到人们 关注。为了更好的了解和研究牙菌斑的构成以及其在口腔生态中的作用，人们不断地尝试在体外模拟牙菌 194 斑的发生和发展模型。 3口腔细菌体外模型建立的探索 口腔微生物种类繁多，部分微生物对营养要求很高而难于培养，所以早期的研究者一般都是收集唾液 的代谢变化。直接用唾液的沉淀有以下主要优点： (1)易大量收集和制备，省去大量的菌种分离和培养的工作； (2)唾液沉淀中既含有丰富的微生物资源，还含有利于微生物生长的各种代谢产物和酶类。 (3)比较容易模拟真正口腔的微生态环境。 然而利用唾液沉淀进行研究也存在诸多明显的缺陷和限制： (1)每次收集的唾液沉淀中的成分均有差异； (2)需要花费大量的时间和精力准确地定性定量的了解沉淀中的成分； (3)难以按照实验的需要收集所需的唾液沉淀。 鉴于以上不足，人们又开始探索用已知的口腔细菌定性和定量地混合培养。由于恒化器可以单独调节各 种微生物的生长影响因子(如pa值、营养物质的流加量、氧气等)便于进行不同性质的实验研究，因此人们很快 toidesinteimedius和Fusobaeteriumnucleatum。这些口腔细菌既包括兼性厌氧菌，也包括专性厌氧菌。接着Brad． 物和pH值对这个微生物菌落中微生物组成变化的影响。研究表明添加葡萄糖后，pH维持在7．0附近，微生物 的组成变化不大；但如果添加葡萄糖后，在6个小时内不调节pH值，而是让它自由降低，则微生物的组成就会 型上进行改进，利用羟基磷灰石片(Hyclmxyapatite V．dispar，Prevotellanigresceus。F．nucleatum和Porphyromonasgingivails。模型的建立分两阶段，第一阶段为需氧培 该模型中的微生物群落无论在悬浮的状态下还是形成生物膜状态下培养，在生长的后期菌落中的转性厌氧菌 所占的比例都会显著的增加。 film 得一定厚度的生物膜。即利用CDFF可以对体外培养所获得的牙菌斑一生物膜进行更深入和细致的研究。 后者弱。研究发现在添加尿素和不