培养法与直接法外周血淋巴细胞微核率的比较研究.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)12(4):34-351990 培养法与直接法外周血琳巴细胞 微核率的比较研究 白玉书 张秀霞 关树荣 卫（生部工业卫生实验所，北京） 用 ‘Co-r-线 1.0-5.9Gy照射狗，比较照后 12小时培养法和直接法外周血淋巴细胞微核率，结 果微核率随剂量增加而增加，培养法增加的速度和幅度明显高于直接法，经统计学分析二者存在一定的 相关性． 关键词：微核率，00Cor射线，淋巴细胞培养 微核测定法被许多国家不同实验室证明是 二（）微核标本的制备和观察 一种快速而敏感的测定染色体损伤的方法，是 1．直接法 取0.4毫升静脉血 肝（素抗 检测致癌剂、诱变剂常用的遗传毒理学方法。在 凝），加0.2毫升0.5多甲基纤维素 预（先配制， 辐射领域内，除了用作辐射剂量估算的指标外， 4℃保存）混匀，在38℃恒温箱中放置20-30 在远后效应观察、辐射流行病学调查及抗放药 分钟后，吸出上清液，并将其离心 （1000转／分） 物筛选等方面也得到了较广泛的应用比吕，。 10分钟，去上清，用沉淀物涂片，瑞氏染色。 目前应用较多的是小鼠骨髓多染性红细胞 2．培养法 用微量全血培养法，培养温 和外周血淋巴细胞微核测定。在电离辐射损伤 度为3810.5cC，培养72小时，不加秋水仙素， 研究中主要用后者，它包括培养和直接两种方 培养终止后直接吸出上层液，往沉淀物中加3 法，在培养的方法中又有常规法和加松胞素B 毫升 0.075mo1/LKCl，随之加 1毫升固定液 的方法切。培养法主要用于辐射事故受照者的 （冰乙酸：甲醇二1:3),混匀后离心 （1000转／ 生物剂量估算[27，直接法多用于辐射远后效应 分）10分钟，去上清，沉淀物涂片，瑞氏染色。 观察和辐射流行病学调查等方面；培养法是通 培养法只计数转化淋巴细胞并记录其微 过 PHA刺激T淋巴细胞转化，观察转化的T 核，转化淋巴细胞判断标准同前文31〔，除高剂量 淋巴细胞中的微核 ，直接法是观察所有淋巴细 组淋巴细胞数过低外，一般每组观察 5000- 胞 （包括T和B）微核。本文 目的是试图通过两 10000个淋巴细胞。 种方法微核率的比较，找出二者之间关系。 微核细胞率及微核率以千分率 %（,o）表示， 为避免由于计数部位不同造成的误差，只计数 材 料 和 方 法 涂片的中1/3部位或全片[41［0 一（）动物分组和照射条件 结 果 和 讨 论 实验用体重 18.0-25.0公斤健康北京郊区 杂种狗，年龄 1-3岁，雌雄两性，随机分成 1.0, 照后 12小时两种方法的微核率列于表 to cronucleus 3.0和5.0戈瑞照射3组，照前采血作 自身对 BaiYushuetal.:ComparisonofMi Frequenciesin PeripheralBloodLymphocytesby 照，每组2-3只动物。IICo-r线一次全身照 MethodsofCultureat记 Direct 射，照射量率为27.92伦／分。 本文于 1988年12月3日收到。 衰1照后12小时两种方法橄核率编（）的比较 剂量 (Gy） 培 养