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噻唑蓝比色法检测细菌生长和存活状况的研究.pdf
31 5 Vol. 31 No. 5
2002 10 JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH Oct . 2002 361
: 1000- 8020 ( 2002 05- 0361- 02 ##
张建清 刘晓波1
, 518020
: 建立了细菌生长和存活状况检测的噻唑蓝( MTT 比色分析法将S . aureus 和E . coli 菌以平 菌
落计数法计数活菌数量, 将一定数量细菌或经煮沸处理细菌加入微孔 , 同时加入MTT, 于36~ 37e 培养, 加
入DMSO 溶解, 于510nm 波长处测定A 值; 将一定数量活菌, 加入不同数量MTT , 孵育不同时间, 用不同量
DMSO 溶解, 于不同波长处测定A 值, 以优化细菌MTT 比色分析法条件结果表明: ( 1 MTT 能被活细菌利
用, 形成的fomazan 数量与细菌浓度成线性关系; ( 2 细菌经煮沸后MTT 显色, A 值明显降低, 与煮沸时间成正
比例; ( 3 MTT 加入后在0~ 2h 内A 值与作用时间成正相关; ( 4 MTT 浓度增加, A 值有 一定程度增大; ( 5 以
DMSO 为Formazan 溶解剂, 其最大吸收波长范围为510 ~ 530nm ; ( 6 以菌液体积的234 倍量加入DMSO 均可
较好地溶解Formazan 颗粒MTT 比色分析法能反映活细菌的生长, 存活状况; 其较适宜的参数: MTT 终浓度
01 3mgPml, 作用时间2h, 溶解剂DMSO 量为菌液量2 倍, 最大吸收波长范围为510 ~ 530nm
: 噻唑蓝 细菌 比色分析 存活率
: Q- 331 : A
Study on tetrazolium salt colorimetric assay for growth and survival of bacteria
Zhang Jianqing, Liu Xiaobo
Center for Disease Control of Shenzhen , Shenzhen 518020 , China
Abstract: To establish a tetrazolium salt ( MTT colorimetric assay for bacteria growth and survival , living or boiling
killed bacteria S . aureus and E . coli were incubated w ith MTT in microdilution plate for 36- 37e at different time . DM-
SO w as added as formazan dissolvent and the mixtures w ere measured for optical density( A or absorbence at 510nm w ave
length . Living bact
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