外源基因在转基因植物中表达量的优化研究进展.pdfVIP

2008年第1期 外源基因在转基因植物中表达量的优化研究进展 张二芹1，王会岩2，张同旭3 3．南阳市第四职业中专，河南南阳473000) 摘要：转基因植物作为一种生物反应器将在生物工艺学上得到应用，其目的是为了生产和传输外 源蛋白。但是外源基因在转基因植物中表达量低，为此，从几个方面介绍了提高外源基因在植物中 表达量的方法。 关键词：转基因植物；外源基因；表达；方法 中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：1004—3268(2008)01—0008—05 technology)是指把物是一种高效而廉价的表达系统，目前主要有两种： 转基因技术[1’2](transgenic 从动物、植物或微生物中分离到的目的基因，通过微 一种是稳定表达系统；另一种是瞬时表达系统。 生物介导、人工原生质体、显微注射以及基因枪轰击 1．1稳定表达系统 等方法，直接导入到植物体细胞内，这些导人的外源 将编码重组蛋白的DNA序列克隆到植物表达 基因能够整合到转基因植物体内的染色体DNA 载体中，利用农杆菌介导的转化技术或者基因枪技 上，并能稳定地遗传给下一代，生产出特定基因编码 术，将此DNA序列的一个或多个拷贝整合到植物 的蛋白质或其他具有生物活性的物质，从而改变植 的基因组上或者植物细胞的叶绿体内。这样植物转 物的某些性能和特征，在基因水平上对植物进行有 化体可以把表达重组蛋白的性状遗传给子代，从而 效地调控。自从1983年首次获得转基因植物后，至形成稳定的表达植物疫苗的植物品系。迄今为止， 今已有35科120多种植物转基因获得成功。1986所获得的转基因植物大部分是使用稳定表达系统， 年首批转基因植物被批准进入田间试验，至今国际 其优越性在于一次转化后，即可通过无性繁殖获得 上已有30个国家批准数千例转基因植物进入田间 大量转基因植物。稳定表达体系多数是通过根癌农 试验，涉及的植物种类有40多种。 杆菌株介导将外源基因转染到植物体内，农杆菌T 虽然现在已经有许多转基因植物投入田间试 —DNA的结构特点与真核基因结构基本相同：在基 验，但是外源基因在植物的表达量受多种因素的影 响，如表达体系、启动子及增强子等，从而表现出表 达量低、蛋白含量少、不稳定以及基因表达出现沉默 个或多个多聚腺苷酸的信号肽序列AATAA。T— 等。研究人员为了解决这些问题，进行了不断的探 DNA基因没有内含子。其进入植物细胞后能够借 索，下面将外源基因在转基因植物中表达量的优化 助植物细胞的系统进行复制、整合和表达，是与核 做一综述，供参考。 DNA基因完全相同的稳定表达。 可是有些单子叶植物(玉米、小麦等)不适应农 1转基因植物表达系统‘3“3 杆菌的转化，因此，通过轰击方法(基因枪方法)把微 金属粒子包裹的DNA注射到植物细胞里，结合到 在没有转基因植物之前，外源基因主要在细菌、 ，植物染色体DNA上。轰击法转基因的综合拷贝数 动植物细胞、酵母等系统表达外源蛋白，这些蛋白在 比农杆菌高，能增强表达。 预防或者治疗传染病过程中起到了重要的作用，但 叶绿体基因组较小，对其性质的研究比较透彻， 是也存在着生产工序繁琐、价格昂贵等缺点，因而在 目前已掌握了18个物种的基因组全序列信息，这意 实际应用当中比较有限。与以上表达系统相比，植 味着对外源基因即将进入基因环境有了详细了解。 收稿日期：2007—07—