斑马鱼整体原位杂交的技术改良.pdfVIP

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2015-08-26 发布于重庆
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斑马鱼整体原位杂交的技术改良.pdf

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斑马鱼整体原位杂交的技术改良.pdf

第19卷第1期激光生物学报 V01．19No．1 2010年2月 LASER Feb。2010 ACTA BIOLOGYSINICA doi：10。3969／j．issn．1007—7146，2010。01．021 斑马鱼整体原位杂交的技术改良樊螗冶，彭忠禄，谢华平，莫小阳，王跃群，邓云，万永奇，李永青‘，吴秀山‘ (湖南师范大学生命科学院蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心，湖南长沙410081) 摘要：斑马鱼整体原位杂交技术广泛应用于基因表达谱、基因间相互关系和突变体筛选等方面，是研究斑马鱼发育相关基因功能的重要技术。本文从杂交探针的制备、浓度的选择和洗脱以及胚胎的脱色、蛋白酶K消化、底物显色等方顽进行了摸索、改进及简化，获得了背景低、着色清晰、特异性高的实验结果，预示了简单实用、成本低廉的斑马鱼整胚原位杂交技术平台的成功建立。关键词：技术改良；整体原位杂交；斑马鱼胚胎中图分类号：Q132．7 文献标识码：A 文章编号：1007-7146(2010)01-0115-05 of situ Zebrafish Whole-mount／n to Embryos Improvement Hybridization FAN Hong—ye，PENGZhong—lu，XIEHua-ping，YUANWu-zhou，WANGYue—qun， DENG Yun，WANG Yong-qi，MOXiao-yang，LIyo昭·qing’，聊Xiu-shan’ ofLife Normal LabofNationalEducation Science，Hunan Ministry， (College University，Key theCenterforHeart 41008 1，Hunan，China) Development，Changsha whole-mount伽situis usedin Abstract：Zebrafishembryos hybridization interaction， widely geneexpression，gene mutantscreenandotherfields．Itisan to thefunctionofzebrafish related importanttechniquestudy developmentgenes． Inthis have and zebrafish whole—mountinsitu study，weimprovedsimplified embryos hybridizationthroughoptimizing severs]conditionswhichinclude andconcentrationofthe embry- preparation probe，thewashingpro