灯盏花素干预大鼠肝星状细胞TGFβ1αSMA的表达.pdfVIP

灯盏花素干预大鼠肝星状细胞TGFl3。、OL—SMA的表达 孟庆媛林明华 郭梦凡 刘东璞 卢凤关 王 抒 (佳木斯大学司法鉴定中心，黑龙江 佳木斯 154007) [摘要] w 喂服灯盏花素。60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、灯盏花素高剂量组、灯盏花素中剂量组、灯盏花素低剂量组、秋水仙碱组。用药4 常对照组“一SMAmRNA及蛋白有显著性差异(P0．01)；灯盏花素不同剂量组均能使Ot-SMA 常对照组TG邸lmRNA及蛋白有显著性差异(PO．01)，灯盏花素不同剂量组均能使TGFBI 光镜显示：灯盏花素各剂量组的肝脏病理学改变较模型组减轻。结论①灯盏花素能保护肝细胞活性，促进肝细胞修复再生；降低转氨酶，具有抗肝 纤维化作用。②灯盏花素可以降低d—SMA、TG即l表达，抑制星状细胞激活。 (关键词]灯盏花素；肝纤维化；平滑肌肌动蛋白；转化生长因子 [中图分类号]R28[文献标识码]A 灯盏花素¨“’(Breviscapine．Bre)是从灯盏花中提取的黄照组与模型组给予等量生理盐水灌胃。于第12周末处死各组 酮类有效成分，具有广泛的生理活性。肝星状细胞”‘¨(hepat．实验动物，收集血清及肝脏标本待检。 icstellate cell，HSC)与肝纤维化形成密切相关。在慢性损伤因1．2．2 检测方法(1)血清丙氨酸转氨酶(alanine 素的持续作用下，肝内分泌大量细胞因子，其中最主要的是转 ferase，ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate growth 化生长因子(transformingfactor—D，TGF—B)，它们在肝组 采用全自动生化分析仪检测。(2)免疫组织化学法检测肝组织 织内沉积，使HSC活化，同时细胞的表型也向成纤维样细胞转 muscle 变，表达d一平滑肌肌动蛋白(仅．smoothactin，O／．．SMA)。 mol／L 子水，灭活内源性酶。将切片浸入0．02 7．2～7．6磷 pH 本文主要研究Bre对大鼠HSC分泌TGFl3。、仅．SMA的干预作 酸盐缓冲液(PBS)，微波炉加热抗原修复，后放置室温自然冷 用，探讨HSC抗肝纤维化作用的可能机制。 min。滴加 却30min。5％小牛血清(BSA)封闭液37。C孵育15 1材料与方法 联苯胺(DAB)显色，苏木素复染，脱水，透明，封片。 1．1 材料 1．2．3 1．1．1 实验动物纯系Wistar大鼠60只，雌、雄各半，2—3月 龄，体重200—250g，由佳木斯大学动物实验中心提供。 1．1．2 实验药品Bre片(神威药业有限公司)；CCl4(郑州化 bp，退火温度为 学试剂二厂)；RT—PCR试剂盒(大连宝生物有限公司)；TGFl3． 免疫组化试剂盒、d．SMA免疫组化试剂盒(武汉博士得生物工GACTC-3 程有限公司产品)。 58℃，扩增片段长度为400 1．2 方法 TAATGGTGGACCGCAACAAC-3’．A：5 bp。PCR反应 1．2．1分组与造模将60只Wistar大鼠随机分为6组：正常AAG