焦磷酸测序法快速检测胰腺癌Kras基因点突变.pdfVIP

主堡捡堕匡堂盘查!!Q!堡!旦筮!!鲞笠!塑曼!也』!坐丛鲤：堕塑!!塑!：y!!!!：盟!：! 结 果 1．焦磷酸测序结果：49例胰腺癌石蜡包埋组织 61．2％，突变结果见表1、图2右侧。正常胰腺组织 中有35例发生K—ras基因12密码子点突变，占 10名、慢性胰腺炎11例、胰腺良性囊肿18例、胰岛 71．4％，突变结果见表1、图2左侧。其中3例标本 存在GAT和G町两种突变方式，而正常胰腺组织素癌7例、壶腹癌9例、胆管癌7例及十二指肠乳头 癌7例均未见K—ms基因12密码子点突变。所有能 10名、慢性胰腺炎11例、胰腺良性囊肿18例、胰岛 被Sanger测序法测出的突变都能被焦磷酸测序法 素癌7例、壶腹癌9例、胆管癌7例及十二指肠乳头 检出，反之，5例能被焦磷酸测序测出的突变未能被 癌7例均未见K．ras基因12密码子点突变。 Sanger测序法检出。 表l胰腺癌K—ras基因Exonl12密码子点突变测序结果 经统计学分析，两方法检测K—ras基因12密码 3．841∥毹05(1)，Po．05)。 讨 论 注：焦磷酸测序发现3例标本存在GAT和G1T两种突变方式 胰腺癌是一种高度恶性肿瘤，其5年生存率低 于5％，并且近年来患病率有明显上升迹象，但其早 期诊断仍相当困难。目前，分子生物学研究发现， K-ras基因是与胰腺癌高度相关的癌基因，有望成为 胰腺癌早期诊断的基因标志物。 多种多样，主要分测序法和非测序法两大类，非测序 法用于突变筛查，难以检测稀有突变类型如1个等 位基因上存在2种突变方式等，而测序法是确定突 变类型的金标准。最常用的测序法是sanger测序 法。焦磷酸测序法是近来广受推崇的新型测序技 术，该法不需要毛细管、荧光染料和同位素，操作极 为简便，一轮反应中可同时进行96个平行或不平行 的检测，10—60min可完成96个样品的检测，能满 足高通量分析的要求和临床需要H刮 因为肿瘤组织是一种由肿瘤细胞和非肿瘤细胞如炎 症细胞、血管内皮细胞和间质细胞等组成的异质性 组织。焦磷酸测序法通过峰高(即荧光信号强度) 定量地检测各种突变