沙丁胺醇直接竞争ELISA+法快速测定.pdfVIP

270 2010, Vol. 31, No. 20 食品科学 ※分析检测 ELISA 1 , 2 2 2 , 2 2 2 1 3 王保玲 ，袁利鹏 ，雷红涛 * ，徐振林 ，杨金易 ，孙远明 ，丁 武 ，庞 杰 (1.西北农林科技大学食品科学与工程学院，陕西 杨凌 712100 ；2.广东省食品质量安全重点实验室， 华南农业大学食品学院，广东 广州 510642 ；3.福建农林大学食品科技学院，福建 福州 350002) ：建立沙丁胺醇的直接竞争ELISA(dcELISA)快速检测方法，采用高碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记沙丁 胺醇单克隆抗体，棋盘滴定法确定包被抗原质量浓度和抗体稀释倍数，通过单因素试验，考察反应体系中表面活 性剂、离子浓度、甲醇体积分数、pH 值因素对 dcELISA 性能的影响，确定最优检测条件，同时考察方法的特异 性。结果表明：酶标抗体克分子比为 2.1 时偶合物的滴度最高，最佳反应条件为包被抗原质量浓度 1 μg/mL ，酶标 抗体稀释 2560 倍，0.01mol/L 、pH7.4 的磷酸盐抗体稀释液(PBS) 中含体积分数0.05% 的Tween-20 、0.5mol/L NaCl 溶液和体积分数 5% 的甲醇时dcELISA 具有最高的灵敏度和最好的稳定性，所建立方法的 IC50 为 10.3ng/mL，检测 限为0.049ng/mL ，线性范围0.3～76.30ng/mL ，批内变异系数 13.8%，批间变异系数为22.38% ，与克伦特罗交叉 反应率为 321.18% ，与溴布特罗交差反应率为29.09% ，与其他结构类似物没有明显交叉反应。本研究所建立的 dcELISA 可用于沙丁胺醇和克伦特罗的多残留检测。 ：沙丁胺醇；酶标抗体；直接竞争ELISA Direct Competitive Enzyme-linked Immunosorbent Assay for the Rapid Determination of Salbutamol 1,2 2 2, 2 2 WANG Bao-ling ，YUAN Li-peng ，LEI Hong-tao *，XU Zhen-lin ，YANG Jin-yi ， 2 1 3 SUN Yuan-ming ，DING Wu ，PANG Jie (1. College of Food Science and Engineering, Northwest A F University, Yangling 712100, China ；2. Key Laboratory of Food Quality and Safety of Guangdong Province, College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China ；3. College of Food Science, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China) Abstract ：A direct competitive enzym