小议在MTT法测细胞增殖抑制率中I5的计算方法Co.pdfVIP

· 834 · 安 徽 医 药 AnhuiMedicalandPharmaceutical_，0urnal 2007Sep；11(9) ◇小专论◇ 小议在 MTT法测细胞增殖抑制率中IC5o的计算方法 赵 斌 ，葛金芳 ，朱娟娟 ，黄晓晖 ，李 俊 (安徽医科大学1．药学院；2．基础医学院生物教研室，安徽 合肥 230032) 摘要：半数抑制浓度、半数致死量等半数量是分析和比较药效 ②将横坐标的剂量改为对数剂量 ，则曲线就化成为对称 及毒效的重要数值，可用以测定药物安全性、比较效价等，其 的常态 曲线； 具体应用范围广泛，但计算相同。本文阐述了半数抑制浓度 ③剂量对数值与死亡率间为S型曲线，向心对称，对称 中 (Ic )的概念、含义、计算原理以及几种具有实际应用价值 、 心纵坐标为50％死亡率，横坐标为 LogIC。。该 曲线的两端 精密度较好的计算方法。重点讨论在 MrITr法测药物对细胞 平坦，中间陡斜，曲线中段死亡率在 50％附近 的点 比5％、 增殖抑制的影响中计算 Ic 的特点和注意事项等，对正确、简 95％的点更为重要； 便求解 Ic 值进行了初步探讨。 ④剂量对数值与概率单位之间为直线关系。为了便于数 关键词：半数抑制浓度；IC M1丫r 学回归分析 ，需要将 S型曲线转化为直线，引入 “机率单位” (Probit)的概念，通过查表可将死亡率转化为 “机率单位”。 半数抑制浓度 (50％ concentrationofinhibition，IC50)、半 所有不同的LD 计算方法都是基于这些质反应的特点 数致死量 (MedianLethalDosage，LDo)、半数致死接触时间、 设计和推导的。通过以上的分析，我们可以知道药物浓度和 半数有效量等反映药效或毒效的半数定量指标都建立在质反 抑制率并不呈明确的直线相关，而是药物抑制率的机率单位 应 (如动物的存亡、有效与否等定性反应)的量一效关系基础上 同药物浓度的对数值呈直线关系。有人通过仅仅以药物浓度 的数据 ，其性质、特点、统计计算和数学规律均基本相同。 为横坐标，以抑制率为纵坐标，作X、Y的散点图，直线拟合， 1 IC 的概念及含义 求得直线回归方程来计算 Ic 我们认为这种方法不够严谨， 半数抑制浓度(IC ) 是指在用药后存活的细胞数量减 理论依据不足，不完全符合计算原理，计算结果不可信。并且 少一半时所需的药物浓度。在MTF法中，就是以对照组吸光 在实际应用中，往往很难作出一条满意的直线 ，相关系数太 度OD值减少一半所需的药物浓度为 Ic。。除此以外，半数 小，故不推荐采用。 抑制浓度的含义还相当于药物对培养细胞的最小致死剂量的 3 IC50的计算方法及适用条件 平均值，作为反映药效的定量指标，在各种药物的筛选中广泛 计算 Ic 的方法多达几十余种 ，包括正规机率单位法、 应用。该结论可由1926年Wijngaarden在 573头家猫身上进 点斜法 、顾汉颐氏公式法、图解法、寇氏法、序贯法、Logit法 行了洋地黄制剂的最小致死量实验中得出。 等，近年来 ，又出现了上下移位法 (up—and—down 法) 、固定 MrITr法检测药物影响细胞增殖的原理是只有存活的细 剂量法(Fixeddoseprecedure) 、评估法等 。，本文主要介 胞能使外源性 的 MTI还 原 为难 溶 的蓝 色结 晶物 甲璜 绍几种精密度较好，有实际应用价值的方法。其他方法虽多， (formazan)并沉积在细胞 中，在二 甲亚砜中溶解显色，而死细 但无特殊优点。 胞不能利用MrIrr故不能显色 对每个细胞而言只有死亡 31 正规机率单位法 Bliss所创建，后为Fisher等所发展 与存活、显色与不显色两种情况 ，