快速微波BG法免疫组化技术及其应用.pdfVIP

／ 口医学院学报 1993年 第 10卷 第 3 快速微波BG法免疫组化技术及其应用 触靴 醮栅科型置 政 苏红 RI、 ，，歹，／ 提娶 本文利用MW产生的超高遗震动及穿透技直． 加违抗原抗体结台反应为原理．将MW辐射虚甩手A BC法生癌蛆化染色 并与常规ABC法进行了对比实验研究。结果袁明，本法显著缩短切片染色时同．由常 蕊 蛙 的 18h2omin所能完成的染色程序缩短为21rain，省 17h59mln。且敏感性靶特异性明显优于常规倍 ． 切片 絷 包背景 青晰 ．结果稳逆 ．重复生好 ．对立用于病理组飙学研究硬临床虎理快速诊断 ，很有使用竹篮 ． 关麓词 竺兰 仕‘ 目前，免疫组化技术 巳成为病理学研究 辐射烤片5rain，然后常规 脱 蜡至 水 ．@ 和临床病理诊断的重要方法学。但常规免疫 0。1胰蛋~ (PHT．8)消化，MW 5档 3 组化技术，其染色十分费时，脱片率高 ，结果 rain；@PBS(o。01M．PH7。 4)洗涤切 片3o 不稳定及背景染色过深 ．影 响切片染色质量 Sx2次j④ 3 正常羊血清封 闭．MW 5楮 及诊断．我们利用微波 (mtcfOWaVa，MW) 3rain，彝去血清 ⑤第 1抗体孵育 ．MW 产 生超高速震动及穿透效应，以加速抗原抗 5档4rain)④同③ J⑦生物素化第 1抗体孵 体结合反应为原理 将MW辐射与ABC标记 育 ．MW 5档4mia ⑧同@ @ABC试 方法相结合，并与常规ABC法进行 了对 比 剂 ．MW5档4rainj@ 同@ @DA B一 实验研究，建立了一种快速MW—ABC法免 H。O。显色．MW 5档辐射显 色 3rain：@ 疫组化染色新技术 为病理组织学研究及Il占 切片水洗 @常规苏木糈复染30S．酒精 脱 床 病理诊断提供了快速有效的新方法 。 水 ，二 甲苯透 明．树胶封片。 材料与方法 染色结果分 为 4级： 一 ”为 阴 性 l、医用Mw仪：YWY781A型医 用 M “+ 为阳性 ： “廿 为强阳性 “卅 为 W仪(浙江临安 电子器材厂生产)。工作频率 极强l性 2450MHZ，波长12cm，输出 功 率 为3e一 三石 罘 500W 。没有 l一 8个调功率档次。本实 验 l、染色前石蜡切片处理 常规法需在 用 5档 ，输 出功率为1ooW 。 65’C烤箱 内烤片 3— 4h防止脱片 。本法 将 2 组织标本及试剂；所有组织均为 已 切片用MW 3档直接辐射烤片 5min。 经1(福尔马林固定的常规病理 活检的 各种 2、染色时间；本法只用21rain就可 完 肿瘤组织 。组织经常规法脱水 ，石蜡包埋切 成常规法 18h20min才能完成 的染色程 序 ， 片。冰冻切片及细胞涂片均经丙酮固定 。各 较常规法省时 17h59min。两种染色时 间 对 种单(多)克隆抗体均为DAKO公司产 品 。 比见表 l。 生物素化羊抗兔IgG(1：150)、羊抗鼠lgG 3，染色结果：在组织标本 ，抗体种类 (1：150)和ABC试剂均为Yector公 司 生 及其稀释度相同条件下我们做了23种抗体染 产。DAB显色剂为国产(购自北京医药站)． 色，大部分荣色的l阳性强度与常规法同，部分 3，操作方法：①石蜡切片用Mw 3档 抗体(如SlOO，k