毕赤酵母表达系统及其在水产领域的应用.pdfVIP

基 础 研 究 责 任 编 辑 / 王 冬 武 毕赤酵母表达系统及其在水产领域的应用 ●郭小泽 + 摘要:主要阐述了毕赤酵母表达系统构成、特点及 () 型为甲醇快利用型,此型毕赤酵母具有完整的 1Mut 其在水产领域的应用现状。 和 基因,绝大多数毕赤酵母为 +表型。 AOX1 AOX2 Mut 关键词:毕赤酵母;表达系统;水产 () 型,此型毕赤酵母 如 菌细胞 基 2Muts ( KM71) AOX2 因编码的醇氧化酶可依赖 15%AOX活性,为甲醇慢利 毕赤酵母表达系统是目前最优秀、应用最广泛的 用型。() 型 如 ,此型毕赤酵母 3Mut2 ( MC100-3) AOX1 外源基因表达系统之一,它不但克服了大肠杆菌表达 及AOX2基因均被敲除,为甲醇不利用型。研究发现, 系统不能表达结构复杂的蛋白质、表达的蛋白多形成 蛋 白酶 缺 陷型 毕 赤酵 母 , , 和 SMD1163SMD1165 不溶性包涵体、背景蛋白多、表达产量低等缺陷,而且 SMD1168可有效降低外源目的蛋白的酶解。一般说 弥补了哺乳类细胞、昆虫细胞表达系统操作复杂、表达 来,蛋白胞内表达时,优先考虑用Muts表型,对于分泌 水平低、产业化生产造价昂贵的不足。本文就毕赤酵母 表达, 和 都可使用。甲醇慢利用型有时比 Mut+ Muts 表达系统及其在水产领域的应用进展作一综述。 型菌株能够达到更高的表达量。(见表 ) Mut+ 1 1 毕赤酵母表达系统 表 1 常用的毕赤酵母表达菌株 菌株 基因型 表现型 [1] 毕赤酵母是一种甲醇营养型酵母 。该系统以甲醇 + GS115 his4 Mut 为唯一的碳源和能源,可以在含有甲醇的培养基中生 - KM71 aox1△::SARG4his4arg4 MutsHis aox1△::SARG4:Phihis4 - 长。甲醇能够迅速诱导巴氏毕赤酵母合成大量的乙醇 MC100-3