细胞凋亡检测的研究进展.pdfVIP

安徽医科大学学报 　A cta Universitatis M edicinalis A nhui 　2002 Dec ;37 (6) ·4 11 · ◇专家笔谈 ◇ 细胞凋亡检测的研究进展 朱启星 　沈 　彤 主题词 　脱噬作用 112 　膜对称性改变 ———细胞外膜上磷脂酰丝氨 中图分类号 　R32925 ( ) 酸 Pho sp hatidylserine , PS 的检测 　细胞受到凋 文献标识码 A 文章编号 1000 - 1492 (2002) 06 - 04 11 - 04 亡诱导后不久 , PS 从细胞膜 内侧转移到外侧 ,成为 免疫系统的识别标志 。将能与 PS 高亲和力特异性 ( ) 　　细胞凋亡 Apopto sis , 又称细胞程序性死亡 结合的钙依赖性磷脂结合蛋白AnnexinV 进行荧光 ( Programmed Cell Deat h ,PCD) ,是细胞在一定的生 ( ) 素 F I TC 、P E 、E GFP 或Biotin 标记 ,作为荧光探针 , 理或病理条件下 ,遵循自身程序 , 自己结束其生命的 利用流式细胞仪 、荧光显微镜或酶联显色反应可检 过程 。它是一个主动的 ,高度有序的、基因控制的、 测细胞凋亡的发生 〔3 〕。这种凋亡早期的活细胞检 一系列酶参与的过程 。它被认为是维持机体内环境 测对悬浮细胞和贴壁细胞都适用 , 与 DNA 染料或 稳定 ,清除衰老和无能细胞的重要机制 〔1〕。研究证 别的晚期检测方法结合可标记凋亡的发展阶段 ,如 实细胞凋亡紊乱与许多疾病的发生和发展有关 ,正 Annexin V 联合 P I 法可将凋亡早晚期细胞以及死 是由于其在病理学研究中的重要作用 , 引起了人们 细胞区分开来 ; 由于 PS 外露发生早于 DNA 断裂 , 对其机制和组分的广泛而深入研究 ,近年来已成为 以及不需固定细胞 ,故此法定量检测早期细胞凋亡 目前生命科学界研究热点之一 ,也是生命科学界乃 较 TUN EL 法更灵敏 ,且可避免 P I 染色法因固定造 至社会各界争相投入的研究领域 。细胞凋亡的启动 成的细胞碎片过多和 TUN EL 法固定造成的 DNA 和执行过程中有许多重要事件 ,可通过一定的方法 片段丢失 ,结果更为可靠 ,是 目前最为理想的检测细 和技术进行检测 。细胞凋亡的检测不仅对实验理论 胞凋亡的方法 。另外 ,磁珠包被的Annexin V ,可用 研究有重要意义 ,而且可用于指导临床疾病的诊断 于磁分选方法筛选凋亡细胞 。 和防治 。随着这方面研究的持续升温 ,涌现出了大 1 . 2 　细胞内氧化还原状态改变的检测 　凋亡早期 量新的技术和方法 ,其中不少已经有商品化产品出 出现细胞内氧化还原状态改变 ,通常用体外检测凋 现 ,大大加速了研究的进程 。现就近年来针对细胞 ( ) 亡细胞胞质中谷胱甘肽 GSH 的减少来反映这一变 凋亡不同阶段有关检测方法的研究进展作一综述如 化 ,其显示了细胞凋亡研究中相对较新的趋势 。细 下 。