股蓝浸出液的抑瘤作用皲.pdfVIP

剖 枝 -L垂极 髓 荤{贺 — ^皲 股蓝浸 出液的抑瘤作用 云法 R?79 (杭州大学生物 系 ．310012) 摘 要 定期给荷瘤小鼠注射或灌服一定剂量浓度的缎股蓝浸出液后 ，小鼠体质增强，胸腺的萎缩速 度减慢 ，每克体重的胸腺和脾脏 重均显著高于对照组 ．胸腺与脾脏每克重细胞数增多．每克体重 的瘤重明显降低，瘤细胞数减少 ，取荷瘤小鼠胸腺淋巴细胞与瘤细胞离体混台培养后，披致敏的淋 巴细胞的 “粘瘤 和。钻瘤 作用加强，癌细胞发生轻度皱缩 ，淋 巴细胞钻入的癌细胞发生裂解，碎片 逐渐增多，而淋 巴细胞的形态和数量无变化．实验结果表明：绞股蓝浸出液具有增强荷瘤小鼠免疫 力和抑制 ；肿瘤生长的作用． 关键词：!竺竺，苎!兰 胸腺淋巴细胞淋巴细胞与癌细胞混合培养熊堕呦 抑福 绞股蓝 (GynostemmaPentaIhyllum)为葫芦科植物，至今从该植物中已提取 出85种 以上 类似人参皂苷物质．据报道绞股蓝是一种具有与人参作用相似的免疫增强剂 ，其 中含有原人参 二醇及原人参三醇化合物 ，具有抗肿瘤作用．机体免疫状态对肿瘤的发生发展有着密切关系， 荷瘤机体的免疫功能随着瘤龄的增 长而逐渐降低 ]．胸腺和脾脏是机体生理重要的免疫器 官，在细胞免疫系统的建立中具有重要作用．将绞股蓝浸出液给 Ehrlich腹水癌小鼠腹腔注射 和灌胃，观察其胸腺和脾脏的重量及每克重细胞数的动态变化 ，癌重及癌细胞数量的变化 ，以 及在离体混合培养中，被致敏的T淋巴细胞的钻瘤作用 (Emperipolesis)． 1 材料和方法 1．1 动物及肿瘤模型 NIH纯种小 鼠，雄性 ，体重 l8±0．5g，Ehrlich腹水癌 (EAC)d,鼠，按 常规接种 ，瘤细胞浓度为 l×107／m1． 1．2 绞股蓝浸出液制备 取绞股蓝全划粉末 ，加生理盐水 200ml，80℃浸泡 24h后，抽滤除 菌 ，调 pH至 7．4，置冰箱备用． 1．3 培养液的制备 RPMI一1640培养基，加 4rnmol／IL一谷氨酰胺 ，25mmol／1Hepes，5×10 mo[／[B_巯基 乙醇，即为基础液，按 Andersson等 方法制备条件液．10 小牛血清加20 条件 液的基础液即为工作培养液 ，内含 ConA 5~g／mi． 1．4 实验分组 对照组 由腹腔注射Hank’s液；实验一组腹腔注射绞股蓝浸出液 ；实验二组为 灌 胃组 ，各组用药量均为0．5ml／只，隔 日一次，共5次，每组均为l0只小鼠，饲养10d断颈处 文稿收到 日期 ，1990—11一2 1期 虞研原等 ： 毁股蓝浸 出液 的抑瘤作用 51 死 ，无菌取材，分别测定其体重 ，瘤重及每克重细胞数，胸腺与脾脏重及每克重细胞数，所测数 据均经X±SD统计，并经方差分析． 1．5 混合细胞培养和粘癌、钻瘤实验 分别无菌取荷瘤5及10d小鼠的胸腺和腹水，制成淋 巴细胞和瘤细胞悬液，预培养4h，除去巨噬细胞，台盼蓝拒染法计算活细胞数后，分别调整细 胞浓度为5×10／ml和5×10／ml，等量混合后分为二组．对照组不加任何药物 ，实验组每毫升 悬液中加0．1ml浸出液 ，每瓶2ml，37℃培养 ，连续观察6b，每小时一次，于400倍倒置生物显微 镜下计数200个瘤细胞，按下式换算粘瘤 (钻瘤)指数： 粘瘤c钻瘤指数=百萄锱 誊蒿兼 ×100％ 2 结 果 2．1 浸出液对荷瘤10d小鼠EAC细胞增殖的影响 给药组瘤 鼠每克体重的瘤重与对照组相 比，虽无显著性差异 (P0．05)，但经方差分析， 瘤细胞增长速度减慢 ，明显低于对照组，其中以腹腔给药组非常显著(P0．01)，见表I、2． 表 l EAC细胞数 ／g瘤重资料的方差分析 表2 EAC绑胞数，g瘤重资料的差异显著性