视网膜光损伤凋亡机制研究进展.docVIP

视网膜光损伤凋亡机制研究进展 　　作者：刘凯，刘丹 作者单位：辽宁医学院附属第一医院眼科，辽宁 锦州 121000 　　【关键词】 视网膜光损伤 凋亡机制 研究进展 　　光对视网膜的损伤包括热灼伤、光化学损伤和机械损伤三种方式。因为眼内组织色素分布的差异，蓝光主要在神经上皮层吸收，主要引起视网膜光化学损伤;绿光在神经上皮和色素上皮的吸收相近;黄光主要在色素上皮和脉络膜浅层被吸收;红光则作用得更深，主要引起热效应;而高能量的激光可以引起机械损伤。凋亡是视网膜细胞光损伤的主要结果之一，氧化损伤、钙稳态失衡和线粒体损伤在凋亡过程中起着不同的作用。 　　1 氧化损伤导致的视网膜细胞凋亡 　　视网膜光损伤的主要损伤部位通常是在光感受器[1]，但也有研究认为主要损伤在视网膜色素上皮细胞、Muller细胞及视网膜全层的线粒体[2]。视网膜细胞尤其是光感受器细胞和色素上皮细胞代谢活跃，又处于富氧环境中，适当频率的光子和氧分子在视网膜外层可发生光化学反应，生成活性氧产物。花生四烯酸是细胞膜中的一种不饱和脂肪酸，在活性氧作用下可不经环氧化酶作用而生成过氧化产物isoprostane， Tzvete Dentchev等[3]在对Balb/c小鼠视网膜提取物的检测结果显示，伴随光损伤程度加重相应的isoprostane 异构体F2Α-VI含量的明显升高，这与以往对其它氧化指标的研究结果相符。细胞膜构成物质的破坏可导致其通透性的上升，使膜两侧各种物质如钙离子，钠钾离子的平衡状态发生改变，触发凋亡，严重的可以直接引起细胞死亡。 　　鹿庆等[4]利用次黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶反应产生氧自由基来处理牛RPE细胞，证实氧化损伤后出现了细胞DNA的破坏。一般认为，基因发生异常后由野生型P53基因编码的P53蛋白在细胞周期的G1期发挥检查点功能，一旦发现有缺陷的DNA，它就启动DNA修复机制，如果修复失败，则通过直接激活bax凋亡基因或下调bcl-2抗凋亡基因的表达而诱导凋亡。但是，Marti A与Hafezi F[5]等通过对P53基因缺失的c57小鼠的研究发现,P53缺失与P53不缺失小鼠的光感受器细胞在细胞凋亡,结构改变及功能损伤等方面都无显著性差异。推测可能与光感受器细胞的细胞周期停滞特性有关，在凋亡过程中可能由其它基因起着作用。 　　NF-ΚB是一种广泛存在于真核细胞胞浆中的转录因子，它可被氧化剂和紫外线等多种细胞外刺激激活。激活后的NF-ΚB与其抑制蛋白IΚB解离，然后自胞浆进入胞核与靶序列结合，调节基因的表达。将培养的鼠感光细胞暴露于4.5 mw/mm的可见光后，细胞可出现凋亡及时间依赖的NF- ΚB水平降低。光感受器细胞经显性负突变型IΚB a 转染后，伴随NF- ΚB水平的明显下调光感受器细胞凋亡也加速[6]。提示NF-ΚB Rel 亚单位在核内的存在，对于保护光感受器细胞免受光诱导的凋亡具有重要的作用。 　　另外，氧化应激可改变细胞膜的通透性使Ca2+内流增加， Ballinger等[7]的研究表明，慢性的、低水平的ROI(reactive oxygen intermediates)持续存在将通过线粒体DNA的损伤启动视网膜色素上皮细胞的功能障碍。 　　2 钙稳态失衡与视网膜细胞凋亡 　　以往的研究发现，在大多数细胞凋亡过程中，胞内Ca2+浓度有所增加，而钙释放通道是细胞内钙增加的主要来源。Edward DP[8]和Li[9]等分别使用氟桂利嗪(flunarizine)和尼莫地平(Nimodipine)治疗实验性大鼠视网膜光损伤，结果证明前者损伤减轻而后者无效，提示内钙的释放才是胞内Ca2+浓度升高的主要原因。1，4，5-三磷酸肌醇受体(IP3R)主要分布于内质网(ER)，外界的刺激作用于细胞，通过G蛋白偶联受体激活PLC，水解PIP2产生IP3和DG，IP3与受体结合触发内钙释放。胞膜钙通道受刺激可引起Ca2+内流，Ca2+是IP3对IP3R的共同激动剂，又可通过钙调素(CaM)而抑制IP3R介导的Ca2+释放。也有研究认为维拉帕米(Verapamil)能诱导人RPE细胞的凋亡，可能是通过caspase-3途径起作用[10]。一般认为，细胞内Ca2+的释放是触发环节，而细胞内Ca2+浓度在高水平维持需要细胞膜钙通道的持续作用。 　　Ca2+浓度升高引起的其他改变：AP-1 因子如c-fos、jun两大类核磷酸蛋白，与感光细胞的许多生理周期的调节有关：如感光细胞膜盘的脱落，感光细胞特异性基因的表达(如视紫质、转导蛋白)。在Ca2+浓度升高能够刺激fos 和jun 蛋白形成复合体，这些复合体与特异性的DNA 序列结合而发挥作用。张跃红等[11]的实验显示在光照后6 h,