鸡大肠杆菌1型菌毛fimH蛋白结构基因克隆及序列测定.pdfVIP

第27卷 第4期 金 陵 科 技 学 院 学 报 Vo1．27，No．4 2011年 l2月 瓜NAI，oFⅡ S唧 胍 oFTEC GY Dee．，2011 鸡大肠杆菌 1型菌毛fimH蛋白结构基因 克隆及序列测定 戴鼎震 ，崔生玲 ，蒋加进，陈钟鸣，张志成 (金陵科技学院动物科学与技术学院，江苏 南京 210038) 摘 要 ：根据 已发表 的大肠杆菌 1型菌毛 优日基 因序列 ，以产 1型菌毛菌株 MG2(O11)、YR5(O78)、MG12 (O18)基因组DNA为模板，对大肠杆菌1型菌毛fimH 基因进行扩增并与国外同源菌株基因序列进行比对。结果 表明：核酸同源性分别为 97．8 、99．7 、97．8％，氨基酸序列的相似性分别达到98．7 、99。3％、98．0％ 运用 DNA—STAR软件对fimH 蛋 白抗原决定簇进行预测分析，发现它们的抗原决定簇基本相似，这说明fimH基因 序列及氨基酸序列的变异并未对fimH 蛋 白的抗原结构产生明显影响。 关键词：鸡大肠杆菌；1型菌毛；j~mH 基因；克隆；序列测定 中图分类号 ：S855．1 ；Q785 文献标识码 ：A 文章编号 ：1672—755X(2011)04--0O69—06 TheColoningandSequcencingof mH GeneofType1Pili inAvianEscherichiacoli DAIDing—zhen，CUISheng一1ing，JIANGJia—jin，CHEN Zhong—ming，ZHANG Zhi—cheng。 (JinlingInstituteofTechnology，Nanjing210038，China) Abstract：Inthisstudy，throughpolymeraseschainreaction，thefimH geneisamplifiedby PCR from theDNA templateofEscherichiacoliMG2(O11)、YR5(O78)andMG12(O18)，then thePCR productisclonedandthenucleotidesequenceisdeterminedthroughrelatedsoftware analysis．Itisfoundthatnucleotidesequenceof ，，zH geneboth inavianEscherichiacoliand K一12 strian arehighlyhomologous．Thehomology ofgenenucleotidesequence is97．8 、 99．7 and97．8％respectively．Thesequenceofaminoacidis98．7％，99．3 and98．0 re— spectively．TheaminosequencesoffimH isanalysedbyDNA—STARsoftware．Theresultsin— dicatethatthereisnosignificantvariationof；qmH proteinepitope． ． Keywords：avianEscherichiacoli；type1pili；fimH gene；cloning；sequencing 鸡大肠杆菌是一种严重危害养禽业 的病原菌Ⅲ，大肠杆菌病的致病因子很多，但菌毛却是最为重要的 致病因子 ，其主要原 因是它的粘附作用 。病原性大肠杆菌之所 以能在鸡机体 内定居 、增殖，进而获得侵袭的 通道 ，其中1型菌毛对机体呼吸道的粘附起着重要作用，而绝大多数致病性大肠杆菌多具有1型菌毛 引， 因此对鸡大肠杆菌1型菌毛的检测方法就很重要