水产养殖用水生物脱氮技术的初步探索.pdfVIP

创新技术 TIANJINSCEINCE20T1E1C年HN第OLO3G期Y9 伦艳霞 (天津市海纳德动物药业有限公司 天津 300456) 水产养殖用水生物脱氮技术的初步探索 【摘 要】从池塘中分离到一株高活性反硝化细菌，经过分析，初步判断为芽孢杆菌属。在天然养殖水体中，碳氮 摩 尔比达到 8．0：1、菌体浓度达到 10cfu／L时 ，其反硝化 活性即可充分发挥 ，硝 态氮和亚硝 态氮的降解率可分 别达到 94．79％和 99．94％。试验表 明该菌株在养殖水体的生物脱氮方面具有广阔的应用前景。 【关奠词】反硝化细菌 芽孢杆菌 亚硝酸盐 碳氮摩尔比 随着人们对水产 品需求 的增加 ，水产养殖业从传统 的养 养 。每隔一定时间 (2h)取样 ，测定培养基 中剩余的 C(NO2)及 殖模式向集约化 、工厂化椟式转变 。在集约化养殖模式 中，大 菌体 的浊度 。 量 人工饲料的投 喂 、有机 肥料的施加 、水产养殖 动物排泄 的粪 1．1_3 筛选 出的菌株在天然养殖水体 中的反硝化特性。 便 、死亡动植物 的残骸构成 了水体 中有机物来源 的主体 ，进而 1．2 水样采集 使水体 的理化条件不断恶化。水体 中氮素含量超标 ，并积 累了 2010年 7月 8日从天津静海县 某一养殖池塘于早上 5～ 大量 的氨氮 、亚硝酸盐等有害物质 ，最终给养殖户造成 巨大的 6点采集水样 ；pH值为 7．9，硝态氮浓度约为 4．21mg／I~；亚硝态 经济损失 。㈣生物脱氮技术 以其无污染 、脱氮彻底和安全等优 氮浓度约为0．08mg，IJ；化学耗氧量 COD为 19-81～21．50me／L。 点被认为是 目前最经济 、有效 、可行性高 的水体除氮技术。 1．3 反硝化活性检测 本实验通过定 向富集 ，从天津静海县某一常年养殖池塘 水样经脱脂棉过滤后分为两份 ：一份加入 NaNO：作为 富 中分离得到一株具有高效降解亚硝态氮 能力 的反硝化细菌 ， 含亚硝态氮 的水样 ；另一份加入 NaNO 和 KNO，作为 同时富含 并在实验室条件下 ．对该 菌株的天然养殖水体 中的反硝化 特 两种 氮素的水样 ，加入最适合 的碳 源 (O．2g／I．乙醇 )，使 其 中的 性进行 了研 究 ，为在生产实践 中开发应用反硝化细菌提供 了 碳氮摩尔 比达到 10：1，分装于 500mL的血 清瓶 中。按 1％的 有益 的指导 。 量加入纯培养后 的菌株 ，培养 72h后检测水样中硝酸盐和亚 硝酸盐 的含量 。以不加菌 的水样作为对照。另一组不加碳源 的 1 材料和方法 水样 ，考察碳源对菌株反硝化活性 的影响 。亚硝酸盐采用 N一 1．1 菌种分离 (1一萘基 )一乙二胺光度法 ；硝态氮采用紫外分光光度 法测定 ； 从天津静海 县某 一常年养殖池 塘 中采集水样 ，取 1mL水 总氮采用碱性过硫酸钾法 ；CODMn采用酸 高锰酸钾法 ；菌体 样加入到装有 100mL灭菌液的富集培养基 中，置 30℃、130rpm 量采用浊度法 和平板计数法 。 环境 中富集培养 3—4天 ，待培养基浑浊 ；取 1mL培养液进行 1．4 碳氦摩尔比试验 梯度稀释 ，将稀释液分别涂布于溴百里酚培养基 (BTB培养 水样过滤后 ，加入不等量 的最适合碳源 (O．2 L乙醇)，使 基)，置 30℃环境 中培养 1～2天 ，用接种环挑取不 同形态单 其碳氮摩尔 比分别为 4．6：1，8：1，12：l。按 1％的量接入菌 菌落于新 的富集培养基 中置 30oC、130rpm环境 中震荡过夜 体 ，每天定时取样 ，检测水样 中的亚硝酸盐的含量 。 培养。重复划线培养 2～3次 ，直至平板菌落形态单一 ，无其他