消化酶在口服Ⅱ型胶原蛋白治疗类风湿性关节炎中的作用.pdfVIP

第 21卷第 2期 江 苏 大 学 学 报 (医学 版) Vo1．21 No．2 2011年 3月 JournalofJiangsuUniversity(MedicineEdition) Mar．201l 消化酶在 口服 Ⅱ型胶原蛋白治疗类风湿性关节炎中的作用 姜旭淦 ，陈盛霞，吴亮，许化溪 (江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏 镇江 212013) [摘 要] 目的：观察消化酶在体内和体外对天然 Ⅱ型胶原蛋白(nativetype1Icollagen，N—C Ⅱ)和变性Ⅲ型胶原蛋 白(denaturedtypelIcollagen，D—ClI)的酶解作用 ，探讨 ISl服 Ⅱ型胶原蛋 白(typeIIcollagen，CII)治疗类风湿性关节 炎的机制。方法：在体外将 胃蛋 白酶、胰蛋白酶和0一【糜蛋 白酶分别作用于N—C II和D—C Ⅱ，采用 SDS．PAGE电泳和 免疫印迹法分析酶解产物。将 N—ClI和 D—C 1I注入鼠胃内和十二指肠 ，把不同时问收集 的胃和肠 内容物进行 SDS— PAGE电泳分析。结果：N—Cl1分子和亚基都能与兔抗鸡CⅡ抗体反应；D—C Ⅱ可被分解成十多条免疫印迹反应呈阳 性的蛋白片段。CII在 胃、肠道能处于溶解状态。在体外，N—CII在 胃蛋白酶和 一糜蛋白酶作用下电泳和免疫印迹图 谱无变化，而被胰蛋 白酶作用后出现 10条免疫印迹为阳性的条带；D—CII易被上述消化酶分解。N—CII不被 胃内环 境水解，可被肠道消化酶缓慢降解；D—CII可被 胃、肠道消化酶迅速分解。结论：N—c Ⅱ可被胰蛋白酶水解产生多条 活性片段，但对 胃内环境、胃蛋白酶和o．一／糜蛋白酶具有抵抗力；D—CII易被胃、肠道消化酶水解。结果提示 口服cⅡ诱 导免疫耐受、治疗类风湿性关节炎可能与 CⅡ特性和胰蛋 白酶对它的作用有关。 [关键词] Ⅱ型胶原蛋 白；胃蛋白酶；胰蛋 白酶；仅一糜蛋 白酶；类风湿性关节炎 [中图分类号] R593．22 [文献标志码] A [文章编号] 1671—7783(2011)02—0108—05 Effectsofthedigestiveenzymesontreatingrheumatoidarthritis byoraltype lIcollagen JIANGXu—gan，CHEN Sheng—xia， Liang，XUHua—xi (SchoolofMedicalScienceandLaboratoryMedicine，JiangsuUniversity，Zhe~iangJiangsu212013，China) [Abstract] Objective：ToobservetheenzymolysisofdigestiveenzymesonthenativetypeIIcollagen (N—C 11)andthedenaturedtype1Icollagen(D-C11)invitroandinvivoinordertostudythemechanism oftreatingrheumatoidarthritis(RA)byoraladministrationoftype1Icollagen(C11)．Methods：N-C II andD—C 11wererespectivelytreatedwithpepsin．trypsinand -chymotrypsininvitroandtheproductswere analyzedbySDS—PAGEandWesternblotting．N—C 11 andD．C 11wereinfusedtothemurinestomachand duodenum．Thegastriccontentsand intestinalcontentswere collected atdifferenttimeand analyzed by SDS．PAGE．Results：N—C 11anditssubunitscouldallreactwi