宁夏干旱荒漠区苦豆子内生放线菌的分离鉴定.pdfVIP

第32卷 第2期 农 业 科 学 研 究 2O11年6月 Vo1．32No．2 JournalofAgriculturalSciences Jun．2O11 文章编号 ：1673—0747(2011)02—0018—04 宁夏干旱荒漠区苦豆子内生放线菌的分离鉴定 郝 丽，胡美娟 ，马海龙，徐 润，顾沛雯 (宁夏大学 农学院，宁夏 银川 750021) 摘 要 ：采用 3种消毒时间对健康苦豆子种子 内及植株体 内的内生放线菌进行分 离．结果表明：消毒 3rain来消除 非 内生菌 的影响效果较好 ；同一植株分 离出内生放线茵的数量 ，种子最 多，其次是茎部和根部 ，叶部较少．合并形态 相 同的分离物 ，从苦豆子种子 、根 、茎和 叶分离 出的 内生放线菌，经初步鉴定分属 5个属 ，86株为链霉菌属 ，占分离 总数的68．8 ；19株为诺卡 氏菌属 ，占15．2 ；14株为放线茵属 ，占11．2 ，其余分属于小单孢菌属和游动放线 茵属． 关键词 ：苦豆子 ；内生放线茵；分离；鉴定 中图分类号 ：Q93—331 文献标 志码 ：A 研究发现药用植物中含有大量 的内生菌 ，这些 1 材料和方法 内生菌与宿主之 间具有紧密的生态关系 ，产生的次 生代谢产物在病虫害生物防治、医药工业上 的用途 1．1 供试植物 和范围逐渐增大，成为寻找新 的天然活性产物的重 2009年 10月和 2010年 6 7月采 自宁夏盐 要方 向_l1]．植物内生菌具有丰富的生物多样性 ，其多 池、灵武 白芨滩 国家 自然保护 区和贺兰山小 口子 自 样性受多种因素影响．在特殊严酷 的生态系统中生 然保护区的野生苦豆子 ，按种子 、根 、茎、叶 4个部位 存着种类各异的内生菌 ，这些 内生菌在长期的环境 来进行分离． 1．2 内生放线菌的分离和鉴定 选择压力下进化 ，必然会产生具有特殊形态及生理 1．2．1 培养基 NA、高氏1号培养基与PDA培养 功能的类群 ]． 基的成分及配制参照文献[7]． 沙生药用植物苦豆子 (Sophoraalopecuroides 1．2．2 植株处理和 内生放线菌的分离 称取苦豆 L．)为豆科槐属植物 ，主要分布于西北干旱荒漠和 子样品约 0．5g，用清水洗去污泥后 ，在超净 台中用 半荒漠地区，在宁夏种群优势突出，是宁夏重要 的沙 无菌水清洗数十次后 ，用 (酒精)一75 浸泡30s， 生药用植物资源和 自然植被的组成部分．野生资源 再用 (次氯酸钠)===5 浸泡 5、3、lmin后 ，立 即用 分布面积广，蕴藏量大，种群优势突出，是宁夏重要 无菌水洗涤 3～5次 ，研碎，加入到装有 10mL无菌 的道地药材之一[3]．由于其较高 的药用价值和生 生理盐水和玻璃珠的三角瓶 中，涡旋振荡 1min，将 态学功能 ，目前成为国内外研究的热点_l6]，但在植物 悬液分别以3000r／min离心 3min，上清液和最后 内生菌方面研究较少 ，从沙生药用植物 内生放线菌 1遍冲洗无菌水分别涂于