一种快速纯化相思子凝集素的方法.pdfVIP

维普资讯 吉林农业大学学报 2008，30(3)：272～275 http：／／xuebao．jlau．edu．c Journalof,lilinAgriculturalUniversity E-mail：flnd~b@,,ip．sina．corn 一 种快速纯化相思子凝集素的方法 李小兵 ，谢光洪 ，张加力2，杨连玉2，张乃生 ，王 哲 (1．吉林大学畜牧兽医学院，长春 130062；2．吉林农业大学动物科技学院，长春 130118) 摘 要：介绍了一种快速提取、纯化相思子凝集素(Abrusagglutinin，AGG)的方法。以Sepharose6B(琼脂糖凝 胶)为亲和层析介质，结合Hiload26／60Superdex75凝胶层析柱，粗提物经2步层析分离纯化，获得 了高纯度 的AGG。SDS—PAGE电泳时其相对分子量约为 65．4kD，凝集兔红细胞的最小浓度约为O．5t,e／mL，LDs0为 3．6mg／kg。采用该方法可从相思豆中快速制备高纯度AGG。 关键词：相思子凝集素；纯化；亲和层析；凝胶过滤 中图分类号：R392．2；Q949．751．9 文献标识码：A 文章编号：1000．5684(2008)03．0272-04 A RapidPurificationM ethodforAbrusAgglutinin LIXiao—bing’，XIEGuang—hong’ ZHANGJia—li，YANG Lian—yu2，ZHANG Nai．sheng’ ， ， WANG Zhe’ (1．CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedwine，JilinUniversity，Changchun130062，China； 2．ColelgeofAnimalSceinceand Technology，JilinAgriculturalUniversity，Changchun130118，Chi— m ) Abstract：Arapidme~odforextractingandpurifyingabmsagglutininfromjequiritybeanwaspresented． Sepharose6Baffinitycolumnna dHiload26／60Superdex75gelchromatographycolumnwereusde toob． tainhighlypureabmsagglutininfromthecrudeextractsofjequiritybenas．Therelativemolecularweight ofabrusagglutinin，measu~dbySDS—PAGE，wasabout65．4kD．TheLDsovaluewas3． 6mg／kg，na d itCna agglutinaterbabitredcellat0．5t~g／mL．Th iscouldbeanoptionalmethodofrthepurificationof bamsagglutininfrombarusjequiritybeans． Keywords：bamsagglutinin；purification；affinitychromatography；gelfiltration 相思子凝集素(AGG)是存在于豆科植物相思 望有更高的安全性_4 。此外，AGG在非特异性 子(AbmspreeatoriusL．)种子(相思豆)中的一种低 免疫治疗、细胞表面糖链结构研究、探索细胞发 毒性 Ⅱ型核糖体失活蛋 白(RIP)，小鼠半数致死量 育、衰老、分化、癌变细胞膜上糖链的变化等方面 (LD5o)为 5mg／kg，毒性 明显低 于相思子毒素 也有广泛用途l5 。高纯度的AGG对于其活性及 (bar