细胞工程习题(s).docVIP

绪论 1. 生物技术：以生命科学为基础，利用生物体系和工程学原理生产生物制品和创造新物种的一门综合技术。主要包括细胞工程、基因工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程、生化工程。 2. 细胞工程是指应用细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学等方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞或细胞器水平上按照人们的医院来改变下包内的遗传物质，以获得新的生物物种、品种或特种细胞产品的一门综合性技术。 3. 细胞工程主要研究内容：1）动植物细胞与组织培养：主要包括细胞培养、组织培养和器官培养。2）细胞融合3）染色体工程：按人们的需要来添加、削减或替换染色体的一种技术。主要用于新品种的培育。4）胚胎工程：主要针对动物。包括胚胎分割、胚胎融合、细胞核移植、体外受精、胚胎培养等。5）细胞遗传工程：主要包括动物克隆和转基因技术。 4. 细胞工程的应用：1）植物方面的应用：微繁殖技术的应用、细胞大量培养与有用代谢产物生产、单倍体技术的应用、胚培养、原生质体培养、转化。2）动物方面的应用：快速繁殖优良、濒危品种及新品种；利用动物细胞培养生产活性产物、药品；供医学器官修复或移植的组织工程；转基因动物的生物反应器。3）细胞工程在能源、环境保护等领域的应用 第一章组织培养的基本设备和基本方法 1. 植物细胞工程（plant cell engineering）:一种在细胞水平上进行遗传操作的生物技术，它以植物细胞为对象，通过离体培养，实现植物个体快速繁殖、品种改良或有效成分的生产和应用的目的。研究内容：（1）器官培养（organ culture）：指对植物根、茎、叶、花、果实以及各部原基（芽原基、根原基）的培养。（2）胚胎培养（embryo ～）：指以胚珠、幼胚、成熟胚（包括胚乳）为材料的离体培养。（3）组织培养（tissue ～）：指以植物各部分组织为材料的离体培养，如茎组织、叶肉组织、根组织、中柱鞘、形成层、髓组织等。（4）细胞培养（cell ～）：指以能保持较好分散性的植物细胞或很小的细胞团为材料进行的离体培养。（5）原生质体培养（protoplast ～）：指对脱除细胞壁的裸露细胞的培养，使其在特定培养基上重新形成细胞壁，并继续分裂、分化形成完整植株。 2. 基本培养基：培养基由无机营养（大量元素、微量元素）、有机营养（碳源、维生素、氨基酸）和激素这几大类成分构成。不含有激素的培养基称为基本培养基，如常用的基本培养基有MS、LS、AA、SH培养基等。 培养基的基本成分：（1）无机营养（大量、微量）（2）有机营养（碳源、氮源、生理活性物质）（3）植物激素：生长素类（IAA、IBA、NAA）、细胞分裂素类（KT、BA、ZT）、其他类（GA3、ABA、乙烯）。（4）附加物类：琼脂、活性炭、蛋白水解物等。 3. 培养基的灭菌方式：高温消毒、过滤消毒 4. 常用的灭菌方法：1）干热灭菌法：利用鼓风机干箱进行烘烤灭菌。适用于各种玻璃器皿和器械的灭菌消毒。2）湿热灭菌法：利用高压蒸汽灭菌的方法。适用于培养基、蒸馏水、各种器械等物品灭菌。3）熏蒸灭菌法：利用药物熏蒸以达到灭菌的目的。适用于接种室和培养室的灭菌。4）过滤灭菌法：指用细菌过滤器进行灭菌的方法。使用的滤膜孔径在0.3～0.45um范围内。5）药剂灭菌法：指采用一定浓度的化学药品进行灭菌的方法。如氯化汞、漂白粉等。6）烧灼灭菌法：指用酒精灯烧灼进行灭菌的方法。适用于接种器械、瓶口、瓶塞的灭菌。7）照射灭菌法：指用紫外灯照射进行灭菌的方法。适用于接种室内和工作台面的消毒灭菌。 植物材料的消毒方式：次氯酸钙、次氯酸钠、过氧化氢、氯化汞等。 植物材料进行消毒处理后，必须用无菌水冲洗3～4次，以清除消毒的残留。 第二章 植物细胞的全能性与脱分化、再分化 1. 植物细胞全能性（totipotent）：指植物细胞具有该植物体全部遗传信息，在一定条件下如同受精卵一样，具有发育成完整植物体的潜在能力，包括两种含义：1)植物细胞无论是生殖细胞还是体细胞，均具有该物种全部的遗传信息；2）每个植物细胞均具有发育成完整植物体的潜在能力。 离体培养条件下植物细胞全能性实现的途径：①以植物体细胞为材料，植株有两套染色体，可正常开花；②以性细胞为材料，含单套染色体组，不能正常开花；③以原生质体为材料；④通过某种方式促进不同的原生质体融合，得杂种植株；⑤外源基因导入植物细胞。 2. 细胞分化（differentiation）指由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变，或发育方式改变的过程。 3. 胚性细胞(embryogenic cells）：能够在离体环境下增殖，能够分化发育成完整的植株的细胞。 4. 细胞脱分化（dedifferentiation）：指在离体培养条件下，分化细胞失去其原有分化的典型特征，转变为分生状态或胚性状态的现象。条