HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷含量供试品溶液制备方法改进.pdfVIP

山西大学学报(自然科学版)31(4)：577～579，2008 ofShanxi Journal University(Nat．Sci．Ed．) 文章编号：0253—2395(2008)04—0577—03 邢婕，秦雪梅。，张丽增 (山西大学化学化工学院，山西太原030006) 摘要：通过对提取方法、提取时间、D101树脂柱体积、洗涤洗脱奈件的选择，改进了HPLC—ELSD法测定黄芪及 其复方中黄芪甲苷含量的供试品溶液制备过程，并且建立了新的供试品溶液制备方法：先索氏提取4h，然后通过 D101(直径1．5em、柱高12 era)树脂柱，经碱、稀醇溶液洗涤，乙醇洗脱，蒸干，甲醇溶解成供试品溶液．结果表明本 方法操作简便。重现性好，能有效测定黄芪及其复方中黄芪甲苷的舍量． 关键词：HPLC—ELSD法；黄芪甲苷；供试品制备 中图分类号：R284．1；0656文献标识码：A 黄芪甲苷常用作黄芪药材及含黄芪复方的含量测定指标，文献报道n_83供试品制备方法常包括水饱和 正丁醇萃取步骤，此类方法极易产生严重的乳化现象，操作繁杂且重复性和准确度均不理想．本研究工作经 多次试验对供试品制备过程进行了优化和改进，从而提高了供试品的稳定性，并以贞芪扶正颗粒为实验制 剂，通过对提取方法、提取时间及其它纯化条件的优选及验证，建立了合理有效的供试品溶液制备方法．并应 用此方法对黄芪药材、养阴降糖片和贞芪扶正胶囊及颗粒中的黄芪甲苷含量进行了测定，取得了满意结果． 1 实验部分 1．1仪器试剂及药品 依利特P230液相色谱仪，EC2000色谱工作站． 贞芪扶正颗粒(本品，万荣三九药业有限公司)，D101树脂(西安蓝深)，乙腈为色谱纯，水为重蒸水，黄芪 甲苷(中国药品生物制品检定所，批号：110781—200512，供含量测定用)，其它试剂均为分析纯． 1．2检测色谱条件 mm×4．6 l ODS2(200 65)为流动相，流速1mL／ 大连EliteHypersil mm，5弘m)色谱柱，乙腈一水(35 rain，蒸发光散射检测器．理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于8000．(参考条件：雾化温度35℃，蒸发温度 1．3实验方法及结果 1．3．1树脂柱洗涤、洗脱条件的选择 取本品，研成粗粉，精密称取20．0g，以甲醇为溶剂索氏提取6h，提取液浓缩至干，残渣加水15mL，微 热使其溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1．5cm，柱高12cm)，依次以水100mL、质量浓度为l％氢 氧化钠溶液100mL、水200mL、体积分数40％乙醇100mL洗涤，弃去洗涤液，再用体积分数70％乙醇200 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，定容，作为供试品溶液；树脂柱继续用70％ 乙醇洗脱，洗脱液另收集． mL 对上述洗脱过程中经正丁醇萃取后的碱洗涤液、40％乙醇洗涤液及最后50 70％乙醇洗脱液分别蒸 —————— _／ 收稿日期：2007一Ol一09；修回日期：2007—03—26 基金项目：国家自然科学基金 作者简介：邢婕(1980一)，女，助教．*通讯联系人：E—mail．．qinxm@SXU．edu．en 万方数据 578 山西大学学报(自然科学版) 干，用少许甲醇溶解 并测定黄芪甲苷含 量．结果显示除碱洗 A 涤液外，两种浓度的著 醇洗脱液内均含有 l 黄芪甲苷．将40％乙 醇改成30％乙醇、 ?O％乙醇改成95％ 时间／rain 乙醇再进行试验，结 图1 黄芪甲苷色谱图 果30％乙醇洗涤液 HPLC ofstandardsu