正交设计优选掌裂草葡萄中总黄酮的提取工艺 Optimization of Extracting Technology in Total Flavonoids from Ampelopsis aconiti folia Bge.var.palmiloba(Carr.)by Orthogonal Design.pdfVIP

第29卷，第2期 光 谱 实验室 V01．29．No．2 20l ChinescJc船。nnlS 2年3月 of O pcctroscopyl庙0r口￡吖y March。21 2 正交设计优选掌裂草葡萄中总黄酮的 提取工艺① 杜芳艳②邓保炜 张智芳 谢春平 (榆林学院能源化工研究中心陕西省榆林市西沙崇文路2号719000) 摘要以芦丁为标样。采用荧光光度法测定掌裂草葡萄中总黄酮含量。以总黄酮提取率为考察指 标．采用正交设计方法优选最佳提取工艺。结果显示：其优选工艺为：药材加15倍量的60％乙醇，在60℃ 下回流提取2．oh．重复提取3次．总黄酮提取率为35．99％。 关键词掌裂草葡萄；总黄酮；正交设计· 1 引言 葡萄科蛇葡萄属植物，多为民间中草药，具有活血散瘀、消炎止血、清热解毒等功效，用于治疗 风湿脾痛、无名肿毒、骨髓炎等疾病[I]。许多研究表明大多数蛇葡萄属植物的茎叶中含有丰富的黄 酮类化合物，有的含量高达43．4％一44％左右乜]，并且具有广泛的生理活性，可清除氧自由基，抑 制机体内的氧化损伤；可调节人体免疫机能；可用于防治糖尿病、动脉粥样硬化、高血脂等症；同时 具有保肝护肝、抗血栓、抗病毒、抗纤维化、抗肿瘤、止咳去痰，阻断艾滋病病毒感染、抗致突变、抗过 敏等多种作用[3_5]。因此有较高的食用和医用价值，具有广阔的开发应用前景。掌裂草葡萄 藤本植物。生于向阳山坡、路边。分布于东北、华北、内蒙古、江苏、甘肃、陕西及四川等省区。根药 用，有活血散瘀、消炎止痛的功效[6】。关于掌裂草葡萄中黄酮类化合物的研究尚未见报道。为探索掌 裂草葡萄中总黄酮提取工艺，本实验以乙醇为萃取剂，以总黄酮提取率为考察指标，采用正交设计 法，对掌裂草葡萄中总黄酮提取工艺进行了研究。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 一恒科学仪器有限公司)；FSJ一114型多功能粉碎机(广东美的家电有限公司)。 掌裂草葡萄嫩茎叶：采于陕西省米脂县山区内6月份植株(经文献鉴定为原植物“])，取其嫩茎 叶洗净，将供试材料进行去杂处理，用水漂洗并沥干水分；室温阴干，备用。 芦丁标准品(中国药品生物制品检定所，光谱纯)；其余试剂均为分析纯。实验用水为二次蒸馏 ①榆林市科技局重点项目(9760609) ②联系人．手机：【oE—mailldufyol60@163．com 作者简介，杜芳艳(1960一)．女．陕西省米脂县人·教授．主要从事天然产物研究工作。 收稿日期lzoll—05—25；接受日期：zoll—06—24 万方数据 光谱实验室 第29卷 水。 2．2实验方法 2．2．1提取工艺操作 t 残留石油醚，真空干燥。准确称取掌裂草葡萄粉5．oog，以料液比为1：15(mV)的60％乙醇溶液 用。 2．2．2校准曲线 中，加入1mLHAc—NaAc缓冲溶液(pH 好的线性关系。方法的检出限为1．30×10-9mol／L。 ’ 2．2．3样品中总黄酮的测定 酮含量。 2．2．4正交试验优化提取工艺条件 采用单因素轮换试验，考察提取温度、提取时间、溶剂及其浓度、料液比和提取次数对总黄酮提 素，采用L。(34)正交试验对提取条件进行优化，因素水平见表1。 表1 L9(34)正交试验因素水平 3结果与讨论 以总黄酮提取率为考察指标，正交试验结果见表2。由表2极差值显示，各因素对提取率的影 称取6份干燥的掌裂草葡萄各log，按最佳工艺条件平行操作，每份重复提取3次，计算总黄酮提 取率(总黄酮提取率一总黄酮质量浓度×定容体积×提取物质量／样品质量