水貂阿留申病毒部分VP2基因的克隆表达和重组蛋白的免疫学分析 Cloning and Expression of Region VP2 Gene of Aleutian Mink Disease Parvovirus and Analysis of Immunogenicity of the Recombinant Protein.pdfVIP

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2015-09-01 发布于湖北
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水貂阿留申病毒部分VP2基因的克隆表达和重组蛋白的免疫学分析 Cloning and Expression of Region VP2 Gene of Aleutian Mink Disease Parvovirus and Analysis of Immunogenicity of the Recombinant Protein.pdf

吉林农业大学学报2009，31(3)：330～333 http：／／xuebao．伽n．edu．cn JournalJilin of AgriculturalUniversity 水貂阿留申病毒部分VP2基因的克隆表达和重组蛋白的免疫学分析’ 孟庆峰·，一，梁艳婷2，肖成蕊1，宋战昀1，钱爱东2，王伟利1“ 1．吉林出入境检验检疫局，长春130062；2．吉林农业大学动物科学技术学院，长春130118 摘要：根据GenBank中已发表的水貂阿留申病毒(ADV)VP2基因核苷酸序列设计合成l对特异引物，利用和测序分析证实其已正确插入到表达载体中，构建了原核表达载体pET一28a．VP2。阳性重组质粒转化宿主茵 B121，用1PTG进行诱导表达，对表达产物进行SDS—PAGE和免疫印迹分析。结果表明蛋白获得了表达，表达产物的分子质量为2lkD，与理论推测的分子质量一致；在终浓度为lmmoL／L的IPTG诱导下，5h时表达量达到高峰；Westernblot分析表明表达蛋白能被兔抗水貂抗体所识别，具有相应的抗原性。关键词：水貂阿留申病毒；VP2基因；克隆表达；重组蛋白文献标识码：A 文章编号：1000．5684(2009)03-0330—04 中图分类号：Q786；$865．22 MinkDisease and of VP2GeneofAleutian CloningExpressionRegion Parvovirusand of oftheRecombinantProtein Analysislmmunogenicity MENG Yan—tin92，XIAOCheng—ruil，SONGZhan·yunl，QIANAi—don92， Qing—fen912，LIANG WANGWei一¨1 and 1 Animal 1．Jilin Bureau， of Entry-ExitInspectionQuarantineChangchun30062，China；2．College Scienceand 130118，China University，Changchun Technology，JilinAgricultural Abstract：Thewere tothe ofAleutianminkdis- designed completegenomesequences pfimers according inGenBank．ThedomainsofVP2 ofADVstrainwere ease part gene ampli— parvovirus(ADV)published fled PCRandclonedinto endonucleaseand anal— vector．PCR，restriction sequence by pET-28a