[园林植物育种学课件]第9章植物组织培养技术及其在育种中的应用.ppt

第九章 植物组织培养技术及其在育种中的应用 植物组织培养技术是现代植物生物技术的基本技术。 一、 现代生物技术及其基本概念 （一）生物技术概念 生物技术（Biotechnology)，有时也称生物工程（Bioengineering）, 是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础科学的原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类产出所需产品。生物技术是一门综合性学科。现代生物技术已成功地应用于植物育种中。 （二）生物技术的种类 基因工程（Gene Engineering） 细胞工程（Cell Engineering ） 酶工程（Enzyme Engineering ） 发酵工程（Fermentation Engineering ） 蛋白质工程（Protein Engineering ） （三）细胞工程 细胞工程就是在细胞水平研究开发、利用各类细胞的工程。亦即人们根据科学设计改变细胞的遗传基础，通过无菌操作，大量培养细胞、组织乃至完整个体的技术。 （四）克隆概念 分离基因的技术； 扩增基因的技术； 将单一细胞扩增成细胞群体的技术； 将一个生命体复制成一个与之完全相同的新个体的过程； 将单一个体扩增成一个遗传上完全相同的群体。 一个遗传上来源完全相同的生物群体。 二、植物组织培养的基本步骤 1、植物细胞的全能性（Cell Totipotency） 一个植物细胞能产生一个完整植株的固有能力称之为细胞的全能性。 三、植物组织培养技术在育种中的应用 种质资源保护； 优良品种快速繁殖； 诱发和离体筛选突变体； 克服远缘杂交困难； 克服种子发育中的障碍； 单倍体育种的技术环节 基因工程的基础技术 （一）单倍体育种 单倍体的概念及其特点 只含有一套染色体组的生物体； 被子植物的配子体世代。 2. 单倍体植物在育种上的意义 单倍体植物的直接利用； 克服杂种分离，缩短育种年限； 快速获得异花授粉植物的自交系； 单倍体植物的诱变育种； 克服远缘杂种不孕性与不稳定的现象； 3. 单倍体植株和愈伤组织的培养 （1）单倍体材料的采集 单倍体育种的首要问题是如何获得大最的单倍体植株。据现有的研究材料，用花药培养产生单倍体植株有两个途径: 第一是在离体培养的花药中，花粉经过类似胚胎发育的过程直接形成单倍体植物，如烟草、曼陀罗等。 第二是在离体培养的花药中，花粉形成愈伤组织，再从愈伤组织分化出单倍体植株。 （2）花药的接种 接种前的准备工作 接种和培养花药是在无菌条件下进行的，所用的一切用具必须彻底灭菌。 花粉发育时期的鉴定 适宜的花粉发育时期对于提高花粉诱导愈伤组织分化的频率是很重要的，为此，进行花药培养前，要用显微镜进行花粉发育时期的鉴定。 经显微镜检查后，把花粉细胞的发育进期与花药或花序的外部形态联系起来，找出花粉单核期或单核期的花蕾或花序的外部形态标志选取花药进行接种培养。 4. 染色体加倍 处理方式： 试管内进行； 花粉植株定植后进行； 药剂处理； 植株鉴定。 原生质体的概念 植物细胞原生质体是指那些以去除全部细胞壁的细胞。 此时，细胞外仅由细胞膜包裹， 呈圆形只有在高渗溶液中才能相对稳定。 原生质体经适当处理，可与其他细胞融合成新的体细胞。 2. 原生质体的特点 比完整的细胞更容易获得外来遗传物质，为实现异源遗传物质转化提供了较好的实验材料。 原生质体在一定条件下可以融合成杂种细胞，开辟了一条新的育种途径。 3. 发展概况 1892， J. A. Klerker 用机械法获得原生质体； 1960，E.C. Cocking 用酶法首先从番茄根尖中分离出大量有活性的原生质体并通过培养再生出细胞壁形成再生植株; 1960，G. Barski发现, 题细胞原生质体能融合在一起形成单核的、并能进行分裂的杂种细胞； 1972，P.S.Carlon首次获得烟草体细胞种间杂种。 80’s 此项技术在我国得到发展。 4、人工种子的贮存与萌发 低温、干燥、洁净。 （四）基因工程 （一）基因工程的含义 按照人们的愿望， 进行严密的设计， 通过体外 DNA重组技术 和DNA转移技术，有目的地改造生物种性， 使现有物种在短时间内趣于完善， 创造出新的生物类型。 分子标记技术在育种中的应用 1. DNA遗传标记的特点： 数量极多； 遗传上稳定； 排除了环境差异. 2. DNA遗传标记的应用 构建遗传图谱； 分析亲缘关系； 定位农艺性状； 分子