利用子房滴注法获得转高亲和性钾离子转运蛋白基因(AlHAK1)棉花植株.pdfVIP

cottonscience 棉花学报 2015，27(1)：9—15 利用子房滴注法获得转高亲和性钾离子转运蛋白基因(AJHAKl) 棉花植株 刘灵娣1上，唐宏亮I，董丽君1，张书玲1，吴立柱3，杜环1，高佳佳1，赵晓雅1，刘晗1，蒋肖1，刘建凤卜 (1．河北大学生命科学学院，河北保定071002；2．河北省农林科学院经济作物研究所，石家庄05005l； 3．河北农业大学生命科学学院，河北保定071001) 摘要：棉花植株再生困难、基因型依赖性强和转化周期长等因素一直制约着棉花遗传转化的发展。本研究利用 1种不依赖组织培养的转化方法，即子房滴注转化方法将獐茅高亲和性钾离子转运蛋白基因(AⅡ幽K1)导入 棉花基因组中。结果表明在1006株转化幼苗中有44株为卡那抗性植株，其中35株经PcR检测为阳性(T。 代)，转化率为3．5％。southem与Nonhem杂交结果进一步表明外源基因已整合至棉花基因组中并在转录水 mmo卜L-1 平上表达。在提供外源0．05 K+水平下，T．转基因棉花叶片中K+含量约为对照植株的2倍，在根中 约为野生型植株的1．5倍；而在2．5mmo卜L_-K+的正常水平下，转基因棉花与野生型植株K+含量差异不明 显。在50～200mmo卜L…Nacl胁迫条件下，转基因棉花的种子发芽率明显高于野生型植株，尤其是在150 mmo卜L_1Nacl胁迫条件下，转基因植株种子的发芽率是野生型的2．8倍左右。本研究为子房滴注转化体系在 生产实践中的广泛应用提供了理论依据，并为培育适应土壤钾素匮乏及盐渍化环境下生长的棉花新品种提供 了新的种质资源。 关键词：棉花；子房滴注转化；钾离子转运蛋白；转基因植株；钾营养；盐胁迫 中图分类号：s562．035文献标志码：A 文章编号：1002—7807(2015)01．0009．07 Generationof n打sufUm lC Transgenic Trans— Cotton(GossJ，pfumL．)withHigh-affinity Method po№r(AfHAM)ViaOVa妒dr_p Liu Lingdil2，TangH0nglian91，DongLjjuIll，zhangshulin91，wuLizhu3，DuHuanl，Gao Xiaoy— JⅫial，zhao a1，Liu Xia01，Liu Hanl，Jiang Jianfen91+ (1．CoⅡ学ofL恤Sc渤ces a，ld 05005 g成uf山reFo糟s臼)Sc加ces，s^玎fa拍Hangl，∞抽a；3．c07JegeorL桅ScfenceS，Hebei Ag哟uJfure踟『ye瑙慨Baod- 血骗H毒6ef07100l，Ch抽a) Abs响【ct：The for ofcottonisrestricted pmgressdeVelopmentoftransgenicengineering byplantregenerationdif6culty，geno· anda culture andsoon．Inthis type—dependent responsepr010ngedperiod stIldy，ahigh·afHnity ed丘_oma introducedinto