可注射海藻酸钙水凝胶的制备研究.pdfVIP

赵名艳等：可注射海藻酸钙水凝胶的制备研究 可注射海藻酸钙水凝胶的制备研究’ 赵名艳，李立华，周长忍，鲁 路 (暨南大学材料科学与工程系，人工器官与材料教育部工程中心，广东广州510632) 摘 要： 海藻酸钙水凝胶因其良好的生物相容性广 复材料的研究。利用葡萄糖酸内酯分解碳酸钙缓慢释 泛应用于组织工程支架材料的研究。以海藻酸钠 放钙离子产生均匀钙源，形成凝胶，避免海藻酸钙快速 (SA)，碳酸钙，葡萄糖酸内酯(GDL)为原料，通过原位反应而造成的凝胶不均匀性。本文从影响海藻酸钙水 相转变制备可注射凝胶，用于软骨组织微创修复材料 凝胶理化性能的各因素出发，结合软骨细胞培养，得到 的研究。测定了单一变量条件下不同海藻酸钠浓度、， 最适的凝胶组成配比，为软骨组织工程支架材料的制 值(钙离子与羧基的摩尔比)及咒值(葡萄糖酸内酯与 备提供新的思路。 钙离子的摩尔比)对海藻酸凝胶力学强度、溶胀率、浸 2材料与方法 提液PH值等的影响，从而获得各组分最适的配比；另 外，通过原位接种软骨细胞，研究了软骨细胞在凝胶中 2．1材料和仪器 的生长行为。综合海藻酸钙凝胶性能，最终确定海藻 酸钠浓度为2．5％、厂=0．5及尢一0．6为最佳配比；细 胞培养结果表明软骨细胞在凝胶中具有较高的活性且 复精细化工研究所，优级纯，平均粒径20#m)， 维持了其软骨细胞形态，证实了研究制得的海藻酸钙 水凝胶是一种优良的可注射软骨组织工程支架材料。 (广州化学试剂厂，AR)，柠檬酸(广州化学试剂厂， 关键词： 海藻酸钠；可注射凝胶；组织工程；软骨细 AR)，实验中其它试剂均为分析纯。倒置显微镜(Ni- 胞；live-dead染色 中图分类号：R318．08 文献标识码：A AG-1型万能电子实验机(日本岛津)。 文章编号：1001—9731(2010)08-1353-042．2实验方法 2．2．1海藻酸钙凝胶的制备 1 引 言 分别称取一定量的海藻酸钠，加入适量蒸馏水，搅 聚合物水凝胶网络中含有大量的水分，具有了一 拌溶解。按厂一o．5的比值称取碳酸钙，超声分散均匀 种流体的性质，其性能与机体组织极其相似，柔软、润 后加入海藻酸钠溶液中，搅拌均匀。按咒=0．6的比值 湿的表面以及与组织的亲和性大大减少了材料对周围 称取GDL，加入海藻酸钠一碳酸钙的混合液中，搅拌混 组织的刺激性，使得聚合物水凝胶具有良好的生物相 合均匀。将lmL凝胶前溶液倒人试管中测定凝胶化 容性，成为组织工程细胞支架的一大类材料[1]。海藻 时间。其余溶液倒入24孔板中，室温放置24h使其充 酸钠(sodiumalginate，SA)是从天然褐藻中提取的一分凝胶后测定力学、溶胀率、浸提液pH值。 种多糖，是美国食品药品管理局(FDA)批准用于生物2．2．2水凝胶力学性能的测定 医学领域的天然生物材料之一，遇二价金属离子能迅 3组凝胶样品充分凝胶24h后分别用万能力学测 速结合形成凝胶[2]，并且具有良好的生物相容性，因此 试机测试其抗压强度，得到一系列最大应力应变值。 在组织修复材料、生化药物控制释放载体、细胞免疫隔 加载速度为2mm／min，每组样平行测定3次。 离等组织工程领域越来越受到人们的关注[3“]。大量 2．2．3凝胶化时间的测定 研究表明，海藻酸钠水凝胶具有维持软骨细胞形态，促 实验采用试管倾斜法测定样品凝胶化时间，每隔 进软骨细胞增殖等潜能口。]，因而在软骨组织工程领域 30s倾斜盛装有1mL凝胶样品的试管，直至样品停止 中倍受关注。 流动，记录所需时间。 随着再生医学和微创临床治疗的发展，可注射型 2．2．4凝胶浸提液pH值