高效液相色谱法同时测定复方维生素咀嚼片中维生素B1、B2及B6的含量.pdfVIP

JIANGXIJOURNALOF TRADITIONALCHINESEMEDICINE 高效液相色谱法同时测定复方维生素咀嚼片中维生素 B 、B2及 B6的含量 ★ 孙萍’刘辉 李诒光 张文惠 (1．江中药业股份有限公司 南昌330096；2．江西中医学院 南 昌330006) 关键词：维生素B，；维生素B：；维生素B ；含量测定；高效液相色谱法 中图分类号：R927．2 文献标识码：B 复方维生素咀嚼片主要成分为对维生素C、维 70)溶液，超声溶解，冷却到室温，并稀释至刻度，摇 生素B、维生素B：、维生素 B、L一半胱氨酸、葡萄糖 匀，滤过，精密量取续滤液20 ，注入液相色谱仪， 酸锌、中药提取物等，具有促进排铅作用。目前维生 记录色谱图；另取经 105c=【干燥至恒重的维生素 素B、维生素B：及维生素B 的测定方法分别采用 B、维生素B、维生素B6对照品，同法测定，按外标 荧光分光光度法及微生物法，操作过程繁琐、费时， 法，以其相对应的峰面积计算三组分的含量。 不利于生产过程 中产品的质量控制。笔者研究并建 2．3 线性关系的考察 取维生素 B 对照品溶液 立了反相高效液相色谱法同时测定该产品中维生素 (浓度为 3．266、6．532、9．798、13．064、16．330 B、维生素B 及维生素B 三种成分的含量，方法简 mL)；维生素B 对照品溶液(浓度为 1．682、3．346 、 使、快捷 ，结果准确、可靠。 5．046、6．728、8．410txg／mL)，维生素 对照品溶 1 仪器与试药 液 (浓度为 3．830、6．128、7．660、9．192、11．790 g／ 高效液相色谱仪：Agilent1200；维生素B、维生 mL)，按上述色谱条件测定峰面积，以浓度为横坐 素B 及维生素B 对照品由Sigma公司提供；试剂： 标，各 自对应的峰面积为纵坐标作线性回归，维生素 甲醇，色谱纯，其余均为分析纯；复方维生素咀嚼片 B．的线性 回归方程为 A=39．807C一1．o3o4，r= 样品，由江中药业股份有限公司提供。 0．9999，线性范围为3．266～16．330t~g／mL；维生素 2 方法与结果 B 的线性 回归方程为A=46．44C一0．6818，r= 2．1 色谱条件 色谱仪：Agilent1200型；色谱柱 ： 0．9999，线性范围为 1．682～8．410~g／mL；维生素 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，4．6mittx150 B 的线性 回归方程为 A：39．761c+3．2021，r= mm；检测波长：280nm；流速 ：1．0mL／min；流动相 ： 0．9999，线性范围为3．830～11．790t~g／mL。 甲醇-0．03％戊烷磺酸钠与0．03％已烷磺酸钠混合 2．4 重复性试验 取维生素B，、维生素B、维生素 溶液(内含 1％乙酸)=30：70。 B 同一对照液，连续进样 5次，每次20 L，维生素 2．2 测定方法 取本品 10片，研细，精密称取细粉 B 峰面积测量值的RSD为0．13％，维生素 B 峰面 约0．3g，置 50mL量瓶 中，加入 甲醇．1％乙酸 (30： 积测量值的RSD为0．54％，维生素B 峰面积测量 致使薄层板上色谱斑点拖尾较明显。改进后方法延长加热 配制方法提供了参考依据。 回流时间，使西洋参中皂苷类成分在甲醇中溶出更充分，采 参考文献 取氧化铝吸附色谱的方法，去除水溶性和糖类杂质。使皂苷 [1]中华人民共和国药典(一部)[S]．北京化学工业出版社，2005，99 类成分更趋纯净。改用羧 甲基纤维素钠硅胶 G薄层板，使 — 1oo． 展开剂极性更适合于各成分的分离，最终得到色谱斑点清 [2]中华人民共和