用等位基因特异性寡核苷酸ASOPCR快速检测抗多菌灵油菜菌核病菌.pdfVIP

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2015-09-03 发布于安徽
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用等位基因特异性寡核苷酸ASOPCR快速检测抗多菌灵油菜菌核病菌.pdf

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396—1399 中国农业科学2004，37(9)：1 Siientia Sinica Agricultura 用等位基因特异性寡核苷酸(ASO)-PCR快速检测抗多菌灵的油菜菌核病菌李红霞，周明国 (南京农业大学植物保护学院，南京210095) 685bp，包摘要：通过3对兼并性引物扩增获得与墨sclerotiorum抗药性相关的p一微管蛋白基因，金长1 含4个内元，相应的编码447个氨基酸。该基因与其它6种线状真菌的p一微管蛋白基因相比，氨基酸序列同源性现该基因第198位氨基酸由谷氨酸突变为丙氨酸，从而导致田间抗药性的产生。为了快速、准确监测田间抗药性核的基因组DNA为模板扩增，所需时间约为6h，抗药性检出率为100％，与传统菌丝直径法的测定结果相比检测准确率为96％，而传统的检测方法至少需要1～2周。关键词：油菜菌核病菌；D一微管蛋白：多菌灵抗药性；等位基因特异性寡核苷酸(AS0)一PCR IdentificationofCarbendazimResistantStrainsof Rapid sclerotiorum UsingAllele·Specific LI Hong—xia，ZHOUMing—guo (CollegeofPlantProtection，NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095) are mixture controlsclerotinia Abstract：Benzimidazole to rotdiseaseinChina． fungicidesimportantcomponents rape Carbendazim—resistantisolatesofSclerotiniasclerotiorumhavebeendetectedinfieldssince1 996．Inthis of paper,threepairs wereusedto the fromS．sclerotiorum．ThefromS．sclerotiorumhas1685 D—tubulin degenerateprimers amplify gene gene bp． 4 447amino forthedifferenceinthenumberofthe deducedaminoacid includingintrons，encodingacid．Except introns，the oftheB-tubulinfromS．sclerotiorumare95．78％to97．66％identicaltothoseofothersix sequence gene plantpathogenic wasrelatedtoa in filamentous mutationcodon198wherethe acidhas into fungi．Resistance point