仪器分析色谱实验论文.docVIP

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仪器分析色谱实验报告 高效液相色谱测定麦麸阿魏酸含量 High performance liquid chromatographic wheat seeding china-arab ferulic acid 食品科学与工程企业管理2010级3班 姜世浩 学号摘要:【目的】 以高效液相色谱法测定麦麸中的阿魏酸含量【方法】 采用RP-HPLC法,以Hyperclone BDS C18(150×4.60mm,5um,phenomenex)柱为色谱柱,甲醇-水-冰乙酸(25:75:0.75)为流动相,PH=3;柱温30;流速1.0ml.min-1 检测波长320ml,进样量5ul。【结果】阿魏酸进样量在3.2064-48.096ug/ml(R2 =0.9998)范围内浓度与峰面积线性关系良好。【结论】液相色谱法具有一定的简便性、灵敏性、准确性、重属性、可行性。 关键词:高效液相色谱 麦麸 阿魏酸。 Determination 0f Ferulic Acid in wheat bran RP-HPLC Abstract:objective: To establish a method for determination of Feru1ic acid in wheat bran .Method :The saples were detemined by Hyperclone BDS Cl8 column(150×4.6 mm,5um,phenomenex).The mobile phase consisted of methano1 and warter and 1% acetic acid(25:75:0.75).The detection wavelengh was at 32O nm and the flow ralte was 1.O mL/min.Results :The calibration curves of Ferulic acid was linear in the range 0f 3.2064~48.096ug/mL(R2=0.9998).conclusion :The method is simple and accurate, it can conlusion that the contents of Flem1ic acid in different wheat bran is nearby. Key words: RP-HPLC wheat bran ferulic acid 前言 阿魏酸别名3-甲氧基-4-羟基肉桂酸,分子式C10H10O4,有顺式和反式两种。其溶点174,溶于热水,乙醇和乙酸乙酯,稍溶于乙醚,难溶于苯和石油醚,阿魏酸(阿魏酸钠)具有抗血小板聚集,抑制血小板5-羟色胺释放,抑制血小板血栓素A2(TXA2)的生成,增强前列腺素活性,镇痛,缓解血管痉挛等作用。是生产用于治疗心脑血管疾病及白细胞减少等症药品的基本原料。本实验采用RP-HPLC法对麦麸中的阿魏酸的含量测定,方法简便、快速、重现性好,适用于麦麸中阿魏酸的定量分析。 实验目的了解高效液相色谱仪基本结构和工作原理,以及初步掌握其操作技能;学习高效液相色谱保留值定性方法和外标法的标准曲线定量方法 实验×4.60mm)柱为色谱柱,甲醇-水-冰乙酸(25:75:0.75)流动相,PH=3:柱温30oC:流速1.0ml/min;检测波长320nm;进样量5ul。 实验仪器及试剂: 高效液相色谱仪[高压输液泵LC-6A?检测器SPD-10A?保温箱CTO-10AS?进样阀7725I]?电子天平?纯水仪?超声波清洗机试剂:甲醇为色谱醇、水为超纯水、冰乙酸、乙醇以及盐酸为分析纯等;阿魏酸对照品(sigma公司提供)样品处前理:称取10g烘干至恒重的小麦籽粒用粉碎机粉碎后,浸入100ml蒸馏水中加淀粉酶0.2g,在55下,用4%NAOH调PH=8,于恒温水浴锅水浴1h(每10min定期震荡),再用胃蛋白酶0.1g在37下,用6mol.L-1溶液调HP=2,与恒温气浴摇床重再次震荡搅拌1h。之后再用四层纱布过滤,取滤渣于105下烘干2h灭酶,得干沉淀,再次称重(记录实际称重质量)。干沉淀用体积比2:1的碱醇(质量分数4%的NAOH、无水乙醇)溶液按聊液比1:12(w/v)浸润,在40下加入0.3个无水Na2SO3,超声0.5h。用6mol.LHCl溶液调节PH=2,6000rpm.min-1离心15min,去残渣。上清液于50旋转蒸发处其中的乙醇。将余液用流动相定容至50ml,摇匀,用0.45um微孔膜过滤即可。?线性关系的考察:取标准进样量分别为:5、10、15uL,分别加入高效液相色谱仪,记录

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