兽药慢性毒性和致癌试验指导原则.pdfVIP

兽药慢性毒性和致癌试验指导原则 一、概述 （一）定义与目的 慢性毒性和致癌试验是预测药物在临床应用中诱发癌症危险性的评价方法。 在动物的大部分生命期间，经过反复给予受试药物后观察其呈现的慢性毒性作用 及其剂量－反应关系，尤其是进行性和不可逆毒性作用及肿瘤疾患。确定受试药 物的无作用剂量(NOEL)，作为最终评定受试药物能否应用于动物尤其是食品动 物的依据。 为了确保慢性毒性和致癌试验结果的真实性、可靠性和可追溯性，根据新兽 药研究的规律，结合国内兽药毒理学评价的实际情况制定了本指导原则。 （二）适用范围 本指导原则适用于评价兽用化学药品、中兽药、消毒剂及饲料药物添加剂对 动物的慢性毒性和/或致癌性的测定。 长期毒性试验发现有可疑肿瘤发生，某些器官组织细胞异常、药物结果与已 知致癌物有关或代谢物与已知致癌物有关、作用机制为细胞毒类等情况下，要求 进行致癌试验。 二、试验设计 （一）材料与方法 1.实验动物 （1）实验动物种类选择 一般要求选用两个种属的实验动物，即啮齿类和非啮齿类，目前已掌握大白 鼠和小白鼠各品系的特点及诱发肿瘤的敏感性，故可优先将其用于慢性毒性和致 癌试验。对活性不明的受试药物，则应选用两种性别的啮齿类和非啮齿类动物。 （2 ）动物的起始周龄和体重 慢性毒性试验期长，故一般用刚断乳的大鼠或小鼠。大鼠50～70g （出生3～ 4周），小鼠10～15g （出生3周）。动物个体体重的变动范围不超出各性别平均 体重的20% 。 （3 ）动物的性别和数量 每个剂量组的动物数应满足试验结束时进行统计学处理的要求，如大鼠40～ 60只（小鼠数应据此适当增加），一般雌雄各半，雌鼠应为非经产鼠、非孕鼠。 如果将慢性毒性试验与致癌试验结合进行，每组雌雄动物数均应在50只以上。如 计划在试验过程中定期剖杀动物，则动物数应相应增加。 （4 ）肿瘤自发率 实验动物的自然肿瘤发生率原则是控制到越低越好，但试验结果评价时主要 是以在相同条件下观察对照组与各剂量组的肿瘤发生率及其剂量-反应关系作为 判定依据。 2.受试药物 应与其他做非临床和临床试验的兽药为同批次产品。 3.仪器设备 一般生理生化和剖检仪器。 （二）试验步骤 1.剂量组设计 设3～5 剂量组和一个对照组。高剂量组根据90 天喂养试验确定，一般应引 起一些毒性表现或损害作用，但不引起太多动物死亡；低剂量组不引起任何毒性 作用；在高剂量和低剂量之间再设 1～3 剂量组，剂量可按几何级数或其他规律 划分。对照组除了不给予受试药物外，其他各方面都应与试验组相同。如果受试 药物使用了某种毒性不明的介质，则应同时设未处理对照和介质对照。 2.给药方法 经口给药，可加入饲料、饮水中或灌胃。如果受试药物是灌胃给药，应每周 称体重两次，根据体重计算给予受试药物的量。 3.受试药物的配制及存放 （1）一般用蒸馏水作溶剂，如受试药物不溶于水，可用食用植物油、医用 淀粉、羧甲基纤维素等配成乳浊液或悬浊液。受试药物应于灌胃前新鲜配制，除 非有资料表明以溶液（或乳浊液、悬浊液）保存具有稳定性。同时应考虑使用的 介质可能对受试药物的吸收、分布、代谢或储存的影响；对理化性质的影响及由 此引起的毒性特征的影响；对摄食量或饮水量或动物营养状况的影响。 （2 ）受试药物加入饲料中的量不能大于饲料量的5%；受试药物制备或存放 时，要求不影响饲料的营养成分含量和性质。饲料中加入受试药物的量很少时， 宜先将受试药物加入少量饲料中充分混匀后，再加入一定量饲料后混匀，如此反 复3-4 次。 4.饲料 （1）饲料中营养成分应能满足实验动物的营养需要。 （2 ）饲料的污染物如残余杀虫剂、多环芳烃化合物、雌激素、重金属、亚 硝胺类化合物等的含量要控制；不饱和脂肪酸与硒的含量要限制，均应使其不影 响受试药物的试验结果。 5.实验动物饲养管理 （1）同一间动物房中不得放置两种实验动物，也不能同时进行两种受试药 物的毒性试验； （2 ）动物料槽中的饲料每周至少要更换两次。 （3 ）试验期间，动物最好采用单笼饲养，且要求各组动