细粒棘球绦虫AgB8／1-AgB8／2重组嵌合抗原表达系统的构建.pdfVIP

中国人兽共患病学报 5O2 ChineseJourna1ofZoonoses 2011。27 (6) 文章编号：1002—2694(2011)06—0502—04 细粒棘球绦虫AgB8／1一AgB8／2 重组嵌合抗原表达系统的构建* 古力帕丽 ·麦曼提依明 ，马海梅 ，吾拉木 ·马木提 ，陈 洁 ，陈 璐 。，丁剑冰 ，马秀敏 ，温 浩 摘 要 ：目的 构建 pET32a—AgB8／1一AgB8／2原核表达载体，并对其重组蛋 白进行原核细胞表达。方法 从细粒棘球绦 虫原头蚴中提取总RNA，反转录生成 cDNA，以此 cDNA为模板，用基因特异性引物分别扩增 EgAgB8／1和EgAgB8／2基因 编码其分泌型多肽的片段，经测序后，以此两条基因片段为依据，人工合成EgAgB8／1一EgAgB8／2嵌合抗原编码核酸序列，将 其克隆至pUCm—T载体 ，测序鉴定其正确性 。通过对 pUCm—T／AgB8／1一AgB8／2重组质粒进行双酶切 ，将获得 的AgBS／1 AgB8／2嵌合抗原编码核酸序