绵羊肺腺瘤病毒的巢式RT—PCR技术检测.pdfVIP

中国人兽共患病学报 2O1l，27 (6) ChineseJournalofZoonoses 547 文章编号：1002—2694(2011)06—0547—05 绵羊肺腺瘤病毒的巢式RT—PCR技术检测* 赵泽赘 ，刘淑英 ，罗学东 摘 要 ：目的 为能够更加准确、敏感的检测绵羊肺腺瘤病 (sheeppulmonaryadenomatosissPA)。方法 本试验通过外 源性绵羊肺腺瘤病毒的囊膜基因env的TM 区和长末端重复序列LTR的U3区分别设计特异性的内外侧引物，运用巢式 RT-PCR 的方法进行检测 ，同时与普通 RT—PCR进行 比较 。结果 测得 的绵羊肺腺瘤病毒的env基 因和 U3区序列与Gen— Bank中发表的外源性绵羊肺腺瘤病毒基因序列(AF105220)同源性分别为 100 和 98 。特异性试验结果表明本试验设计 的enTd基 因和 LTR 的U3区的内外侧 引物不能从健康绵羊、小鼠、家兔的肺组织以及感染 了SPA羊的肾、肝、脾 的RNA 中扩 增 出条带。敏感性试