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氧化合成己二酸的HPLC成分分析 摘要：本文利用反相高效液相色谱（RP-HPLC），在选定的工作条件下，使氧化合成己二酸各组分得到分离，用紫外检测器检测己二酸和戊二酸。方法简捷、快速、准确度高。 关键词：反相高效液相色谱 己二酸 戊二酸 近年来，以环己烯为原料，催化氧化合成己二酸的研究引起了人们越来越多的关注。产物的定量定性显得尤为重要。工业上己二酸一般采用酸碱滴定法，酚酞作指示剂。本实验所要处理的物系中既含有己二酸又含有戊二酸。酸碱滴定法只能测定出酸的总含量，而无法得出己二酸和戊二酸各自的准确数值，因此不能采用酸碱滴定的方法。寻找简捷、快速、准确度高的检测方法成为首要任务。 1 仪器与试剂 Waters 2695高效液相色谱仪 岛津2998紫外检测器 色谱工作站 甲醇 色谱纯；超纯水；磷酸二氢钾、磷酸、戊二酸、己二酸均为分析纯。 2 实验方法 2.1 色谱条件 色谱柱：waters SymmetryShieldTM RP18反相色谱柱（150 mm×4.6 mm i.d.,5μm）；柱温：35℃；检测波长：206 nm；流速0.8 mL/min；进样量：10 μL。 2.2实验条件 缓冲溶液：配制浓度为0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液，用磷酸调至PH=2.1。 流动相：将配置好的缓冲溶液与甲醇以85:15体积比混合，然后用0.45 μm的滤膜减压过滤。 标准溶液：用流动相配置不同浓度的己二酸戊二酸混合溶液， 0.45 μm的滤膜过滤。 样品溶液：用流动相配制一定浓度的待测样品，0.45 μm的滤膜过滤后备用。 通过自动进样器进样，色谱工作站记录并进行分析处理。实验完毕后，用高纯水及甲醇冲洗柱子。 3 结果与讨论 3.1 检测波长的确定 用190～900 nm紫外-可见光对标准溶液进行扫描，结果表明有机酸在206 nm附近有较大的吸收，重复性好，不受流动相中其他物质的干扰，故实验均采用206 nm波长进行检测。 3.2 流动相选择 缓冲溶液与甲醇以85:15体积比混合，然后用0.45 μm的滤膜减压过滤作为流动相。采用该混合溶液做流动相PH值稳定，同时该混合流动相用0.45 μm的滤膜过滤可以防止缓冲溶液结晶堵塞色谱柱。而缓冲溶液和甲醇通过四元梯度泵混合作流动相难以达到这种效果，因为水相的缓冲溶液遇到有机相的甲醇容易结晶。 3.3 标准曲线的建立 序号 己二酸质量/g 戊二酸质量/g 1 0.2 0.01 2 0.4 0.02 3 0.6 0.03 4 0.8 0.04 5 1.0 0.05 表1 标准溶液的配制 图1 己二酸的标准曲线 图2 戊二酸的标准曲线 羧酸 线性范围g/L 回归方程 相关系数R2 己二酸 2—10 y=504867x-66096 0.9994 戊二酸 0.1— 0.5 y=509338x-5473.7 0.9993 表2 己二酸和戊二酸的回归方程 按表1准确称量己二酸、戊二酸，精确到0.0001 g。用流动相溶解，定容至100 mL。配成五种不同浓度的标准溶液，分别进样10 μL进行色谱分析。线性回归处理峰面积Y与有机酸含量X（g/L）的关系。回归方程列于表2中，所有物质的相关系数均大于0.999，表明线性关系良好。 3.4 精确度的验证 图3 保留时间变化图 准确称量己二酸，用流动相溶解配成标准溶液，连续进样10次进行色谱分析。从图3和图4可见，保留时间和测定的含量都在一定范围波动。经过计算保留时间的极差是0.09%，浓度的测定极差是0.58%。表明该方法测定的重复性良好。 图4 浓度变化图 3.5 准确度的验证 为了验证该方法的准确度，我们进行了酸碱滴定。 精确称量己二酸标样于250ml具塞锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，摇匀使其完全溶解。加3-5滴10g/L酚酞指示液，用氢氧化钠标液【C(NaOH)=0.1mol/L】滴定至溶液呈微（浅）红色，并至少保持30s。同时取50ml水做空白试验。己二酸含量的平均值是99.35%。同时我们用高效液相色谱法测定的含量平均值是99.43%。由此可见该方法准确可靠。 3.6 加标回收率实验 准确称量己二酸标样和样品，用流动相溶解配成五种不同浓度的标准溶液，分别进样10 μL进行色谱分析。测定的加标回收率分别为98.39%、97.13%、96.75%、97.51%和98.53%均大于96%（一般加标回收率为95%—105%），说明该方法有一定应用价值。 结论 实验结果表明，利用反相高效液相色谱同时测定己二酸及戊二酸的方法简便、快捷，具有较好的准确度和精密度，可为氧化合成己二酸成分分析提供可靠的数据。 参考文献 [1] 王向宇等，环己烯催化氧化制己二酸的HPLC研究，郑州大学学报，2004，2（36），80-83 [2] 沃特世科技（上海）有限公