ApoE4对大鼠在体海马L-LTP的影响及其分子机制的分析.pdf

第45卷第2期 太原理工大学学报 V01．45No．2 2014年3月 0FTAIYUANUNIVERSITY0FTECHNOLOGYMar．2014 JOURNAL 文章编号：1007—9432(2014)02—0244一04 ApoE4对大鼠在体海马L—LTP的 影响及其分子机制的分析 乔枫，祁金顺 (山西医科大学基础医学院生理学系，细胞生理学教育部重点实验室，太原030001) 摘 要：探讨载脂蛋白E4(ap01ipoproteinE，apoE4)的神经毒性作用。将12只健康雄性SD 大鼠随机分成对照组和实验组两组(报一6)。采用电生理手段，利用海马给药装置和刺激／记录绑定 程增强(L—LTP)，观察急性注射apoE4后对大鼠海马CAl区LLTP的诱导及维持的影响。并且 通过western 影响L—LTP的分子机制。结果表明，HFSs前注射o．2”gapoE4并没有改变突触传递，对双脉冲 可以损伤海马L—I。TP。这种神经毒性不是突触前神经递质释放所介导，而是通过降低突触后 CREB活性实现的。 关键词：栽脂蛋白E4；阿尔茨海默病；晚期长时程增强；cAMP应答元件结合蛋白 中图分类号：R743 文献标识码：A 阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease，AD)是一有关，后者则包括了薪的蛋白质的合成。虽然 种发生在中枢神经系统中的慢性、原发性、不可逆性 的神经退行性疾病，主要表现为进行性认知功能障 的电生理实验就apoE4对E—LTP的作用做了一定 碍、学习和记忆能力丧失，晚期出现严重痴呆[1]。大 量流行病学调查结果显示有四种基因与其发生有 子机制，目前仍然不清楚。本实验对apoE4的电生 关，包括：淀粉样前体蛋白(amyloid pro— 理机制及其分子机制进行了探究。 precursor tein，APP)、早老素一1(presenilin一1，PS一1)、早老素一 1 材料和方法 2(presen订in一2，PS一2)和载脂蛋白E4(ap01ipopro～ 1．1 tein—E4，APOE4)。其中，APOE4是迟发家族药品与动物实验分组 AD的主要危险因子。APOE4基因纯合子(apoE4 +／+)携带者的AD发病率为未携带该基因者的8 倍[211该基因过表达后的产物apoE4也被证明具 有较强的神经毒性。目前已有资料表明，apoE4可(工作浓度1：100000)购自中杉金桥公司。 与多种致病因素协同作用并且加速AD的发生[3]。 健康雄性SD大鼠12只，体重为250～350g，由 长时程增强(Iong—termpotentiation，LTP)是学习山西医科大学动物中心提供。实验分为对照组(n一 和记忆机制的细胞模型之一。鉴于海马是AD发病 6)和实验组(钾一6)。对照组给与2“L生理盐水。注 过程中最早和最易受累的脑区之一，海马LTP已被 药组给与2pLapoE4(质量浓度为O．1弘g／pL)。 1．2手术及电极定位 广泛用于AD发病机制研究。LTP分为早期LTP 所有动物均用25％乌拉坦腹腔麻醉(1．5 (early—phaseLTP，E—LTP)和晚期LTP(1ate—phase g／kg)。 在三维脑立体定位仪上将大鼠固定后，暴露颅骨，以 LTP，L—LTP)。前者与膜上已有受体蛋白的磷酸化 11—19 收稿日期：2013 基金项目：国家自然科学基金资助项目；山西省自然科学基