血吸虫感染小鼠早期诊断抗原的研究.pdfVIP

中国血吸虫病防治杂志 2011年第23卷第3期 ChinJSchistoControl2011，Vo1．23，No．3 ·273 · [文章编号] 1005—6661(2011)03-0273-06 · 论著 · 血吸虫感染小鼠早期诊断抗原的研究 王瑜，余传信 ，殷旭仁 ，钱春艳 ，宋丽君，许永良，何伟 ，曹国群 [摘要] 目的 对已知的6种 日本血吸虫抗原的早期诊断价值进行评价，为研制用于哨鼠早期诊断的免疫试剂提供候选 抗原。方法 用 日本血吸虫尾蚴感染小鼠，收集感染前及感染后不同时间的小鼠血清。采用重组 日本血吸虫中国大陆株 23kDa膜蛋白大亲水性肽段与谷胱甘肽的融合表达蛋白(GST-HD)、可溶性虫卵抗原 (SEA)、血吸虫四跨膜蛋白第二亲水 基团(TSPHD)、血吸虫虫卵蛋白(IPSE)、日本血吸虫虫卵毛蚴抗原 (SjMP—lO)及 日本血吸虫信号蛋白(sj14—3—3)作为诊断 抗原，采用酶联免疫吸附试验检测感染血吸虫后不同时间小鼠血清中特异性抗体 IgM和IgG水平，通过分析感染后不同时 间点抗原特异性抗体水平变化及阳性率，筛选具有血吸虫感染早期诊断价值的抗原分子。采用免疫印迹试验进一步验证 其对血吸虫急性感染早期诊断的价值 。结果 感染后第 18、21、28天 ，抗GST—HD抗体 IgM阳性率分别为60％、70％、 100％，特异性 IgG阳性率分别为40％、60％、90％：抗SEA抗体 IgM阳性率为50％、60％、90％，特异性 IgG阳性率为20％、 50％、70％；抗TSPHD抗体IgM阳性率为30％、40％、50％，特异性IgG阳性率为20％、30％、70％；抗IPSE抗体IgM阳性率为 20％、30％、50％，特异性IgG阳性率为20％、30％、60％；抗SjMP一10抗体IgM阳性率为 10％、20％、20％，特异性IgG阳性率为 10％、20％、30％；抗Sj14—3—3抗体IgM阳性率为0、10％、20％，特异性IgG阳性率为0、10％、30％。以GST—HD融合蛋白和SEA 为抗原，检测小鼠早期感染血吸虫的敏感性高于s14—3—3、IPSE、TSP、MP一10，检测IgM的敏感性高于IgG。免疫印迹试验结 果显示，SEA中分子量在73kDa左右的蛋白条带可被感染后 1周小鼠血清所识别 ，并随着时间推移反应加强。GST-HD最 早出现反应的血清是感染后第 10天小鼠血清，反应强度在感染后第5周达到最强。结论 重组GST．HD融合蛋白与SEA 中分子量约73kDa的蛋白分子具有血吸虫感染早期诊断价值，免疫印迹试验的敏感性比酶联免疫吸附试验高。 [关键词] 日本血吸虫病；抗原；特异性抗体IgG；特异性抗体IgM；早期诊断；酶联免疫吸附试验；免疫印迹试验 [中图分类号] R383．24 [文献标识码] A Evaluationofearlydiagnosticvalueof6antigensfrom Schistosomajaponi— Cum in m lCe Wang e， Chuan-xin，YinXu—ren，QianChun~an，SongLi-jun，XuYong—liang，HeWei，CaoGuo-qun JiangsuInstituteofParasiticDiseases，KeyLaboratoryonTechnologyforParasiticDiseasePreventionandControl，Ministryof Health，Wuxi214064，China Correspondingauthor [Abstract] Objective Tofindoutthecandidateantigenforimmnnoreagent，whichcouldbeusedtodiagnoseSch~tosoma 一 ponicum infectionearlyinmice．Methods ThemicewereinfectedwithcereariaeofS．japonicumChinesemainlandstrain．The seraofmice