Mut^s型基因重组巴斯德毕赤酵母高密度发酵过程中甲醇流加的控制.pdfVIP

维普资讯 第22卷第 1期 无 锡 轻 工 大 学 学 报 Vo1．22 NO．1 2003年 1月 JournalofWuxiUniversityofLightIndustry Jan． 2003 文章编号：1009—038X[2003)O1—0012一O4 Muts型基因重组巴斯德毕赤酵母高密度 发酵过程中甲醇流加的控制 谢静莉 ， 张 励 ， 叶 勤 ， 周庆玮2， 辛 利2， 杜 鹏2， 甘人宝2 (1．华东理工大学 生物反应器工程 国家重点实验室，上海 200237；2．中国科学院上海生命科学 院，上海 200031) 摘 要 ：在采用Mut。表型基因重组巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)发酵生产血管生长抑制因子 (angiostatin)的过程中．诱导表达阶段 甲醇的质量浓度对血管生长抑制 因子的表达至关重要．因重 组Mut。型巴斯德毕赤酵母利用甲醇极慢，按文献方法流加 甲醇时，甲醇逐渐积 累达 30g／L，血管 生长抑制素表达水平仅为4mg／I．采用甲醇检测与控制系统对 甲醇流加进行反馈控制后，甲醇质 量浓度可稳定控制在设定范围．采用此系统控制诱 导阶段的甲醇流加，同时手动流加适量甘油以 促进细胞生长．血 管生长抑制因子表达水平量最高可达 89mg／I． 关键词：甲醇 电极；巴斯德毕赤酵母；血管生长抑制因子；反馈控制 中图分类号：TQ920．6 文献标识码：A M ethanolFeedingControlinHigh-DensityCultivation of M utRecombinantPichiapastoris XIEJing—li。， ZHANGLi。， YEQin。， ZHOUQing—wei， XINLi， DUPeng2， GANRen．bad (1．StateKeyLaboratoryofBioreactorEngineering，EastChinaUniversityofScienceandTechnology，Shanghai 200237．China；2．InstituteofBiochemistryandCellBiology．ChineseAcademyofSciences．Shanghai200031，China) Abstract：Intheinductionphaseoffed—batch cultivationofrecombinantPichiapastoriswithaMut。 phenotype，methanolconcentrationissignificantforangiostatinexpression．DuetOtheextremelyslow methanolutilizationbythisMut。strain，methanolwasaccumulatedto30g／Iifitwascontinuously addedbasedonthefeedingstrategiesreportedbyotherreference，andthelevelofangiostatinwasonly 4mg／L．A methanolmonitoringandcontrolsystem wasadoptedforfeedbackcontrolofmethanol concentration，andthemethanolconcentrationcanbecontrolledatapredeterminedleve1．During the expressionphase，methanolconcentrationwascontrolled withthisfeeding system ，atthesametime glycerolwasalsoaddedeithercontinuouslyormanuallyinordertOstimulatethecells’growth．Inthis way，thehighestangiostati