真核双基因表达载体pBud-TRAIL-IL-24的构建及其在宫颈癌细胞中的表达.pdfVIP

一 302～ 重庆医科大学学报20l2年第37卷第4期 (JournalofChongqingMedicalUniversity2012 ． VOI．37NO．41 DOI：10．3969／j．issn．0253—3626．2012．04．004 真核双基因表达载体pBud—TRAIL—IL一24的构建 及其在宫颈癌细胞中的表达 潘 明 ，向廷秀 ，章海林 ，陈 妮 ，陈飞兰 ，赖国旗 (1．重庆医科大学实验动物中心，重庆 400016； 2．重庆医科大学附属第一医院分子肿瘤及表观遗传学实验室 ，重庆 400016； 3．泸州医学院药物与功能性食品研究中心，泸州 646000) 摘【 要】目的：构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumornecrosisfactorrelatedapoptosisinducingligand，TRAIL)基因和白 细胞介素24(Interleutin-24，IL-24)基因的真核双基因表达载体，并观察其对宫颈癌细胞生长的影响情况。方法：采用分子克隆 技术，将 IL-24基因插入真核表达载体 pBud—TRAIL中，构建双表达质粒 pBud—TRAIL．IL．24，经酶切和测序鉴定后，转染宫颈癌 HeLa细胞。荧光显微镜和免疫荧光双标技术检测TRAIL和 IL-24在HeLa细胞中的表达。MTY法检测重组质粒对HeLa细胞 生长状况的影响。结果：成功构建了真核双基因表达载体pBud—TRAIL．IL．24，并在宫颈癌细胞中表达；转染48h后可见重组 质粒对宫颈癌细胞生长有明显抑制作用(P0．05)。结论 ：构建的双表达载体pBud．TRAIL—IL．24能在宫颈癌细胞中表达 ，并 可有效抑制宫颈癌HeLa细胞增殖 ，为进一步研究TRAIL和IL一24联合应用于宫颈癌的基因治疗奠定了基础。 【关键词】宫颈癌细胞；双表达载体；TRAIL基因；IL一24基因 【中国图书分类法分类号】Q784 【文献标志码】A 【收稿 日期】2011—11—15 Constructionofeukaryoticco-expressionplasmidpBud-TRAIL-IL-24 andjtsexpressionjflcervicalcancercells PAN Yue ，XIANG Tingxiu ，ZHANGHailin ，CHEN Ni，CHEN Feilan ，LAIGuoqi (．CenterofExperimentalAnimals，ChongqingMedicalUniversity； 2．MolecularOncologyandEpigeneticsLaboratory，theFirstAffiliatedHospital，ChongqingMedicalUniversity； 3．ResearchCenterforDrugandFunctionalFood．L 0“MedicalCollege) A【bstract】Objective：ToconstructtheeukaryoticCO—expressionplasmidencodingTNFrelatedapoptosisinducingligand(TRAIL)gene andinterleukin24(IL一24)geneandtostudyitsinhibitoryeffectoncervicalcancercelllines．Methods：IL2·4genewasinsertedintothe expressionvectorofpBud-TRAILtoobtainco-expressionplasmidpBud-TRAIL—IL一24bymolecularcloningtechnology．