胶质瘤细胞维甲酸代谢调控机制及其对细胞增殖的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(1)：59—64 · 59 · [文章编号] 1000—4718(2012)01—0059—06 胶质瘤细胞维 甲酸代谢调控机制 及其对细胞增殖的影响球 张继君， 谢思明， 林琛莅， 翁泽平， 杜 展 ， 王 超， 钟雪云 (暨南大学医学院病理生理学教研室，广东 广州510632) [摘 要】 目的：探讨胶质瘤细胞中的维甲酸合成调控机制，以及维甲酸对人脑胶质瘤细胞 SWO—Z2的增 殖抑制作用及可能的机制。方法：运用小分子RNA干扰Krtippel样转录因子9(KLF9)；Real—timePCR和Western blotting检测KLb9基因RNAi沉默效率。KLF9基因干扰后 ，运用Westernblotting检测醛脱氢酶 1家族成员A1(AL_ DH1A1)蛋白表达的变化。应用CCK一8法从3种类型维甲酸药物 (13一顺维甲酸、9一顺维甲酸和全反式维 甲酸 分别简称 l3一cisRA、9一cisRA和ATRA)中筛选 出对 SWO—Z2细胞活性抑制作用最强的药物。Westernblotting 检测不同浓度ATRA作用 SWO—Z2细胞后增殖相关蛋白cyclinD1、Bcl一2、cleavedPARP以及胶质瘤分化标记物 GFAP的表达情况。Real—timePCR检测SWO—Z2细胞的维甲酸受体表达情况。结果：小分子RNA干扰KLF9基 因后，成功下调KLF9表达，引起ALDH1A1mRNA和蛋白表达都下降。3种类型维甲酸中ATRA对SWO—Z2细胞 的增殖活性抑制作用最强。ATRA作用 SWO—Z2细胞72h后 cleavedPARP蛋白激活，cyclinD1和Bcl一2表达水 平下降，而GFAP表达没有改变。SWO—Z2细胞维甲酸受体 (RARs)表达降低。结论：KLF9作为ALDHIAI基因的 上游调控基因，通过正调控ALDHIA1基因的表达促进胶质瘤细胞中的维甲酸合成；ATRA处理 SWO—Z2细胞后未 能促进胶质瘤分化而是明显抑制肿瘤细胞增殖能力，可能是 由于胶质瘤细胞内缺乏维甲酸受体所致。 [关键词】 Krfipple样转录因子9；全反式维甲酸 ；受体，维甲酸；醛脱氢酶 1家族成员A1；细胞分化 [中图分类号】 R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．01．011 M etabolicmechanism ofretinoicacidingliomacellsanditsimpactoncell proliferation ZHANGJi—jun，XIESi—ming，LINChen—li，WENGZe—ping，DUZhan，WANG Chao．ZHONG Xue—yun (DepartmentofPathology，SchoolofMedwine，．~nanUniversity，Guangzhou510632，China．E—mail：tzxy@jnu．edu． cn) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatethemechanismforregulatingthesynthesisandmetabolismofretinoicacidin iomacelllineSWO—Z2naditseffectoncellproliferation．M ETHODS：ThesiRNA targetingtohumanKLF9mRNA wastransfectedintoSWO—Z2cells．Thesilencingefficiencywasdetectedbyreal—timePCR andWestern blotting．After silencingofKLF9，theproteinlevelofALDH1A1wasdetectedbyWesternblotting．CCK一8colorimetricassaywasusedto screentheoptimalcon