马铃薯Y病毒分子检测试剂盒研制及株系普查.pdf

摘要 摘 要 virus 马铃薯Y病毒(PotatoY，PVY)对马铃薯的危害最大，可导致马铃薯退化，降 低马铃薯产量，严重时减产可达80％以上，甚至绝产。解决这一问题的重要途径是培养脱 毒种薯或种苗，而高效可靠的病毒检测手段是确保脱毒种薯或种苗无毒的前提和关键。因 此，建立快速、灵敏、规范化的病毒检测体系成为马铃薯产业发展的必然趋势。 检测试剂盒的出现极人推动了脱毒马铃薯生产的发展。由于具有稳定、快捷、易于操 作等优点，很多试剂盒已成为马铃薯病毒检测中的重要_丁具。目前，国内应用的分子检测 试荆盒主要是进口产品。本研究旨在开发供脱毒种苗生产单位使用的一步RT-PCR检测试 剂盒。 根据马铃薯Y病毒外壳蛋白(CP)基因序列设计合成了一对引物LIU-PVYI、 的条带，而健康对照无此目的条带，从而建立了PVY的常规RT-PCR检测技术。以此为基 础，在同一个反应中同时加入反转录和PCR反应所需试剂，反应程序中包括反转录和PCR 反应所需条件，建立了PVY的一步RT-PCR检测技术。 度及PCR反应的退火温度、时间和循环次数等。本研究采用反转录-聚合酶链式反应 薯中心，