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大肠杆菌耐热元器件的构建及其应用.pdf

第 65 卷 第 8 期 化 工 学 报 Vol.65 No.8 August 2014 2014 年 8 月 CIESC Journal ·3128 · 大肠杆菌耐热元器件的构建及其应用 1 2 2 2 2 1,2 孙翔英 ,刘月芹 ,孙欢 ,贾海洋 ,戴大章 ,李春 1 (石河子大学化学化工学院/兵团绿色化工过程重点实验室,新疆 石河子 832003 ; 2 北京理工大学生命学院生物工程系,北京 100081 ) 摘要:以提高大肠杆菌耐热性为目的,基于腾冲嗜热菌(Thermoanaerobacter tengcongensis MB4 )热激蛋白基因 T.te-HSP20 构建了诱导型耐热元器件 T7-T.te-HSP20 和组成型耐热元器件 gapA-T.te-HSP20 ,转入大肠杆菌 (Escherichia coli )获得工程菌 E. coli-TH 和 E. coli-GH 。工程菌E. coli-TH 在 30℃和 IPTG 诱导下,目标蛋白呈 可溶性表达,经 50℃热激 30 min 后,存活率提高了 3.2 倍。高温发酵表明 gapA-T.te-HSP20 扩宽了工程菌 E. coli-GH 的最适生长温度的范围(37~43℃),较大程度提高了大肠杆菌的耐热性。抗逆性分析还发现工程菌 E. coli-GH 具 备了耐热与耐丁醇的双重功能,并有一定的抗乙酸和乙醇能力。为工业梯度升温发酵生产生物基产品的高效制造、 节省成本提供了新思路。 关键词:耐热性;热激蛋白;存活率;抗逆性;大肠杆菌 DOI :10.3969/j.issn.0438-1157.2014.08.038 中图分类号:Q 789 文献标志码:A 文章编号:0438—1157 (2014)08—3128—08 Construction of heat resistance devices for Escherichia coli and their application 1 2 2 2 2 1,2 SUN Xiangying , LIU Yueqin , SUN Huan , JIA Haiyang , DAI Dazhang , LI Chun 1 ( Key Laboratory for Green Processing of Chemical Engineering of Xinjiang Bingtuan/School of Chemistry and Chemical Engineering, Shihezi University, Shihezi 832003, Xinjiang, China; 2School of Life Science, Beijing Institute of Technology,

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