对发酵生产植酸酶过程中植酸酶活性测定方法的初步探讨.pdfVIP

维普资讯 蕾 食品与发酵工业 FoodandFeFinentationIndustries vo1．29 No．9 键 毫 l ■ 0孵～ 对发酵生产植酸酶过程 中植酸酶活性 测定方法的初步探讨 杨平平 王 燕 史宝军 陶文沂 (江南大学生物工程学院生物制药室，无锡 ，214036) 摘 要 以钼蓝法、钼钒法，对标准磷溶液和发酵液 中的植酸酶酶活进行 了测定，并研 究了影 响测定结果 的各个 因素。结果表 明，钼蓝法、钼 钒法均 可用于植 酸酶酶活 的测定，且 同样 有 效，但钼钒法相对快速 、简便 。研究中同时发现 ，发酵过程 中发酵液含有 的无机磷 远远大于酶 活测定产生 的无机磷含量 ，直接用发酵液测得 的植酸酶酶活是不可靠 的。文中采用发酵液透 析后测定酶活，并修正 了测定酶活的计算公式。 关键词 植酸酶，微板，透析，发酵 ，微 生物 植物组织和相应的粮食产品中广泛存在 摇瓶培养基 (％)：葡萄糖 3．0，NH4N03 着植酸极其盐类 ，植酸形式 的磷不但不能被 0．2，M gSO4。7H2O 0．05，KC10．05，M nSO4· 单 胃动物所消化利用，还抑制多种营养成分 7H2O 0．000 5，FeSO4 。7H2O 0．000 5， 的吸收和利用，因而被称为抗营养 因子 (anti— K2HPo40．06，植酸钙 0．5，pH值 自然。 nutritionalfactor，ANF)。 微 板 培 养 基 (％)：葡 萄 糖 3．0。 植酸酶是催化植酸水解成肌醇与磷酸 的 NH4N03 0．2，MgSO4。7H2O0．05，KCl0．05， 一 类酶的总称 ，广泛存在于 自然界，但主要存 MnSO4 ·7H20 0．000 5，FeSO4 ·7H2O 在于植物和微生物 中，但真正具有开发价值 0．0005，植酸钠 0．6，pH值 自然 。 的仅限于利用微生物生产的植酸酶，尤其是 1．1．3 主 要 试 剂 微生物胞外酶 。近年来对 以微生物发酵生产 植酸钠 (Sigma公司产 品)、植酸钙 为化 植酸酶的研 究报道得很多 ，微生物发酵生产 学纯 ，其他试剂均为分析纯 。 植酸酶取得 了很大进展，并 已在饲料和食 品 1．1．4 主要仪器设备 工业 中得到应用。但 目前植酸酶研究和开发 HYG一Ⅱ回转式 恒温调 速 摇 瓶柜 。L 过程中仍然存在发酵酶活低 、酶活单位混乱 、 B50L型立式 圆形压力蒸气灭菌器。FA1004