以GFP为标记的肝癌细胞RNA转染树突状细胞的体外效应.pdf

1046 第四军医大学学报（J Fourth MiI Med Univ ）2006 ；27 （11） http ：/ / journaI. fmmu. edu. cn ·研究原著 · 文章编号：1000-2790 （2006 ）11-1046-03 以GFP 为标记的肝癌细胞RNA 转染树突状细胞的体外效应 张利旺，张红梅，刘文超，潘伯荣，斯晓明，任 军 （第四军医大学西京医院肿瘤中心，陕西 西安7 10033 ） 三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三三 Effect of dendritic cells transfected 【摘 要】目的：探讨GFP 作为标记观察肝癌细胞RNA 转染 DCs 效果的可行性及肿瘤细胞RNA 转染DCs 制备疫苗的可 with total RNA of HepG2 cell line 行性. 方法：绿色荧光蛋白质粒载体 pGFP-C3 稳定转染肝癌 using GFP marker in vitro 细胞HepG2 ，TrizoI 法提取筛选后细胞HepG2-GFP 总RNA ；分 ZHANC Li-wang ，ZHANC Hong-mei ，LI U wen-chao ，PAN Bo- 离肝癌患者外周血单核细胞体外诱导DCs 细胞，总RNA 转染 Rong ，SI Xiao-ming ，REN Jun DCs ，荧光显微镜下观察转染效果，流式细胞仪检测转染前后 Center of CIinicaI OncoIogy ，Xijing HospitaI ，Fourth MiIitary DCs 表型变化；ELISA 法检测转染前后上清中IL-12 变化情 MedicaI University ，Xi an 7 10033 ，China MTT 法检测效应细胞对靶细胞的杀伤率. 结果：pGFP-C3 况； 稳定转染肝癌细胞 HepG2 后可得到稳定表达 GFP 的细胞 【Abstract 】AIM ：To investigate the feasibiIity of GFP as a HepG2-GFP ，荧光显微镜下呈绿色荧光；总 RNA 转染的DCs marker to observe the dendritic ceIIs （DCs ）transfected with totaI 荧光显微镜下呈绿色荧光，CD80 （13. 2% 上升至 86. 7% ）， RNA of tumor ceIIs and the feasibiIity of the transfected DCs HLA-DR （38. 9% 上升至 97 . 9% ），CD83 （0 . 9% 上升至 serving as a vaccine for potentiaI immunotherapy. METHODS ： 97 . 1% ），CD86（31. 2% 上升至92 . 5% ）表达明显升高，上清 PIasmid pGFP-C3 was transfected into HepG2 stabIy. TotaI RNA IL-12 分泌量ng/ L 显著增高（61. 3 1 8. 1、287 . 4 1 29 . 3 ，P was extracted from the HepG2-GFP using TrizoI ；DCs were 0 . 0