基因芯片方法检测6种动物源性人兽共患病病原.pdf

10.3969/j.issn.1008-0589.2011.10.12 基因芯片方法检测6种动物源性人兽共患病病原 王振全1,2 罗宝正2 薄清如2 徐海聂2 沙才华2廖秀云2陈伟生2 1.吉林大学农学部畜牧兽医学院，吉林长春130062;2.珠海出入境检验检疫局国家外来病检测重点实验室，广东珠海519015 摘 要：为了建立可同时检测H5亚型禽流感病毒、狂犬病病毒、猪链球菌2型、炭疽芽孢杆菌、沙门氏 菌、大肠杆菌O157的基因芯片检测方法，本实验根据GenBank中上述6种病原的基因序列，设计并合成了特异 性的引物和探针。采用点样法制备杂交芯片，将上述病原扩增产物混合后与芯片杂交。杂交结果显示，针对本 试验中6种人兽共患传染病所设计的寡核苷酸探针可特异性识别靶基因，与其他常见病原体之间没有交叉反应。 检测的灵敏度在1.38×10-5pg/μL～151pg/μL之间。将建立的基因芯片检测方法对临床样品进行检测，结果与荧 光PCR方法一致。 基因芯片；人兽共患病；检测 S851.34 A 1008-0589(2011)10-0804-04 Detectionofsixanimaloriginalzoonosispathogensbymicroarray WANGZhen-quanLUOBao-zhengBOQing-ruXUHai-nieSHACai-hua LIAOXiu-yunCHENWei-sheng 2011-04-06 广东省科技计划项目(2009B030801075) 王振全(1984-)，男，河南开封人，硕士研究生，主要从事动物传染病分子诊断方面研究. 805 806 @@[1] 丁耀忠，刘永生，张杰.基因芯片技术在口蹄疫检测中的应 用[J].浙江农业科学，2009(2):423-426. @@[2] WangLih-chiann,PanChu-hsiang,LiuLucia.Severinghaus,et al.SimultaneousdetectionanddifferentiationofNewcastledis easeandavianinfluenzavirusesusingoligonucleotidemicroar rays[J].VetMicrobiol,2008,127(34):217-226. @@[3]杨忠苹，王秀荣，石霖，等.区分禽流感病毒亚型诊断芯片 的构建[J].中国动物检疫，2008，25(10):29-32. @@[4] 张辉，杨晓洁，张媛，等.基因芯片技术及其在病原微生物 检测和研究中的应用[J].动物医学进展，2009，30(12): 100-104. @@[5] CowellJK,HawthornL.Theapplicationofmicroarraytechnol ogytotheanalysisofthecancergenome [J].CurrMolMed, 2007,7(1):103-120. @@[6] ItoT,TanakaE,KadowakiT,etal.AnultrasensitivenewDNA microarraychipprovidesgeneexpressionprofilesforpreopera tiveesophagealcancerbiopsieswithoutRNAamplification[J]. Oncology,2007,73(5):366-375. @@[7] 赖铭裕.基因芯片及其在肿瘤研究中的应用[J].医学综述， 2009(13):1960-1962. @@[8] 于凤池.基因芯片技术及其在植物研究中的应用[J].中国农 学通报，2009(6):64-65. @@[9]