家蚕核型多角体病毒orf79克隆及原核表达.pdf

第42卷第9期 东北农业大学学报 42(9)：7“79 ofNortheast 2011年9月 Journal Agricultural University Sep．2011 家蚕核型多角体病毒orf79克隆及原核表达 郝碧芳1，徐叻2，王猛2，沈兴家1 (1．江苏科技大学蚕业研究所．江苏镇江212018：2．江苏科技大学生物与化学工程学院，江苏镇江212018) 摘要：家蚕核型多角体病毒0,／79是苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒口服感染因子4的同源基因，为了研究 off79蛋白在家蚕核型多角体病毒感染过程中与宿主的互作关系，利用PCR技术克I鳖orfl9基因并构建了原核表达 mmol·L-‘的IPTG诱导2h后。off／9蛋白 栽体。并进行表达条件的优化。结果表明，SDS—PAGE检测结果发现O．2 表达量最高，并利用亲和层析纯化技术获得纯化的可溶性重组蛋白。研究结果为利用pull—down技术研究or仃9在 杆状病毒感染宿主过程中的作用机理奠定基础。 关键词：BmNPV；o,／79；原核表达 中图分类号：Q68 文献标志码：A 文章编号：1005—9369(2011)09—0076—04 and oferr79of moilnucleo- expression Bombyx Cloningprocaryotic Re- Bifang’，XUFan92，WANGMen92，SHENXingjial(1．Sericultural pOlyhedrOViruS／HAO search ofScienceand 21201 Institute，JiangsuUniversity Technology,ZhenjiangJiangsu8。China； 2．Schoolof andChemical ofScienceand Biology Engineering，JiangsuUniversity Technology, 21201 ZhenjiangJiangsu8，China) of mort isthe of Abstract：Off79 Bombyxnucleopolyhedrovirushomologousgeneperosinfectivity califomica revealtheinteractionbetweenorf79and factorofAutographanucleopolyhedrovirus．To host inthevirusjnfectionIife was fromvirusandwasinsertedinto amplified cycle．orf79 procaryotic vector．andthe conditionwas indicatedthatorf79was e