家蚕表达人促红细胞生成素口服急性毒性和初步药效学研究.pdf

浙江理工大学学报(自然科学版)，第31卷，第6期，2014年11月 of Sci—Tech Sciences) JournalZhejiang University(Natural V01．31，No．6，Nov．2014 文章编号：1673—3851(2014)06—0728—06 家蚕表达人促红细胞生成素口服急性毒性 和初步药效学研究 李杰h，v，谭淑敏h一，王小飞h．u，舒特俊h-v，于威h．u，张耀洲2．u，陈剑清h．b (1．浙江理工大学，丑生物化学研究所；b．浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室，杭州310018； 2．天津国际生物医药联合研究院，天津300457；3．天津大学药物科学与技术学院，天津300457) 摘要：为了研究家蚕表达的重组人促红细胞生成素(BmrhEPO)口服治疗肾J生贫血的疗效并评价安全性，进 882 865 955 大于147 IU／kg。肾性贫血小鼠以剂量为62IU／kg和20IU／kg的两个剂量组连续口服BmrhEP0一 周，以小鼠血液网织红细胞数及百分率为药效指标，结果显示口服有药效，并且药效与剂量呈正相关。本实验为开 发重组人促红细胞生成素口服药物提供了理论指导和实验基础。 关键词：家蚕；EPo；口服；急性毒性；肾性贫血 中图分类号：Q816 文献标志码：A 血。EPo也被用于治疗癌症患者化疗引起的贫血 0 引 言 和艾滋病患者抗病毒治疗引起的严重贫血症。一些 人促红细胞生成素(humanerythropoietin，患骨质增生症引起的贫血症患者使用rhEPO也有 hEPO)是一个分子量约为36kDa的糖蛋白分子，糖 疗效。一些医疗机构还使用rhEPO治疗因早产或 基化程度大约能达其分子量的40％左右[1‘2]。胎儿外科手术引起的贫血症[1川。rhEPO全球市场已达 发育阶段，hEP0主要是由肝脏产生的，随着发育的到约100亿欧元，在生物制药的全球市场中处于领 进行，hEPO主要由肾脏产生，其主要的生理学作用 是促进红系祖细胞向红细胞的生长与分化[3‘4]。床上主要是通过注射用药。然而，注射用药会引起 1985年，^EPO基因第一次被克隆[5|，从而开启了患者的不适，并且也不方便，特别是慢性患者。因此 EPO的分子生物学研究的新篇章，而且重组人促红 一种替代的用药途径是患者迫切需要的，而口服给 细胞生成素(rhEPO)作为治疗药剂开始服务于患各药由于安全方便而深受患者欢迎。 种贫血病的病人。由于基因重组技术的飞速发展， 家蚕蛹生物反应器是一种高效、经济的昆虫表 重组人促红细胞生素(rhEPO)已经可以通过各种表达系统，其表达的蛋白通过口服给药已经证明有药 达系统表达了[6书]。目前市售rhEPO主要由CHO 效，比如本实验室表达的人粒细胞巨噬细胞刺激因 细胞表达，临床上主要用于治疗肾性贫血症，近期也 子(hGM—CSF)[1 发现了rhEPO具有一些非造血功能，比如保护神 经、大脑和心脏，修复创伤等[9]。全世界越来越多的 患者使用rhEPO或Aranesp有效地治疗了肾性贫血小鼠口服BmrhEPO的初步药效学实验。 收稿日期：2014一01—14 基金项目：国家高技术研究发展计划“863”项目(2011AAl00603) 作者简介：李杰(1988一)，男，湖北谷城人，硕士研究生，研究方向为生物反应器与蛋白质组学。 通信作者：陈剑清，E—mail：cjqgcj@126．com 万方数据 第6期 李杰等：家蚕表达人促红细胞生成素口服急性毒性和初步药效学研究 729 移至PVDF膜上(80V恒压，120min)，取出PVDF 1材料与方法 膜浸入含有5％脱脂奶粉的TBS溶液(pH7．4)中 1．1材