康氏木霉纤维素酶CBHI基因克隆及在大肠杆菌中的表达.pdf

2011No．2 China ·76·SerialNo．227 Brewing Research Report 康氏木霉纤维素酶CBHI基因克隆及在大肠杆菌中的表达 黄时海l，康超l，黄飞，，曹喜秀-，何鑫平I，汪晟-，吴孔阳1，曹普美·，梁智群1，李湘萍：· (1．广西大学生命科学与技术学院，广西南宁530005；2．广西大学动物繁殖研究所，广西南宁530005； 3．南宁新技术创业者中心，广西南宁530007) 酶I(cbh 菌BL21(DE3)plysS，并用0．4mmoFL的IFrG诱导表达重组蛋白。实验结果：cbh 70kDa。 关键词：康氏木霉；纤维二糖水解酶I；cbhI基因；克隆表达 中图分类号：075,3 文献标识码：A 文章编号：0254一∞71(2011)02—0076-04 ofCBHIofTrichodermacellulaseand inEscherichiacob Cloning gone koningii expression HUANG Shihail，KANGCha01，HUANGFeP,CAOXixiul，HEXinpin91，WANGShon91， I WU PumeiLIANG 7dangpin92． Kongyan91，CAO Zhiqunl，LI tl。CollegeofLifeScienceandTechnology,Ouangxi University,Nannin9530005,China,3．NanningNowTechnologyIncubation inserted Ab鲥瞅：CellobiasecbhI wasclonedwithRT-PCR Trichoclcrma cbhl WaS into Koningi gene directly gene byusing cDNA嬲template．The strain the vector u-ansformexlinto after temperamre-inducibleprokaryoticexpressionpET-30a(+)and E．co／／BL21(DE3)plysS inducedwitll4rmnoFLIPTGfor4h．theBL21 strain arecombinant resultsindicatedthat cbhIcould produced cellobiohydrolase．The gene expressed instrainBL2 WaS15．6U／Lundertheconditions 45℃andvalue5．0．Ion activity oftemperature