Ⅱ型超敏反应家兔模型的建立.pdf

·140· JP^m聊I耐‰删，Vol 中国药理学与毒理学杂志2010年4月第24卷第2期踟I 24，N02，Apr2010 Ⅱ型超敏反应家兔模型的建立 张幸国，马葵芬，娄域峰，饶跃峰，赵青威 (浙江大学医学院附属第一医院，浙江杭州310003) 摘要：目的建立Ⅱ型超敏反应家兔模型，为免疫毒理学或药效学研究提供新方法。方法家兔耳缘 静脉注射绵羊红细胞(SRBC)5×108 d，停药ld，连续6周，诱导Ⅱ型超敏反应。 kg～，每天1次，每周连续6 每周观察呼吸和喷嚏等症状，并监测体温，检测血清游离血红蛋白和游离胆红素及尿隐血，计数外周血网织 红细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和血小板，测定血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性及尿素氮和 察组织病理变化。结果与对照组相比，注射SRBC后1～6周，家兔呼吸和喷嚏等症状及体温未见明显变 化，外周血网织红细胞数目和血清游离胆红素浓度未见明显变化。但从第l周开始出现尿隐血，第5周时血 清游离血红蛋白显著增加，提示出现血管内溶血。外周血淋巴细胞从第l周开始显著增加，第4周时中性粒 细胞明显减少，血小板数目未见明显变化，提示粒细胞受损伤。第l和第2周时血清GFr活性增加，第6周 时GOT活性增加，尿素氮和肌酐水平未见明显变化。第3周时血清中出现抗SRBC抗体，第6周时脾脏和 胸腺显著肿大，提示免疫系统参与此过程。第6周时肾脏、脾脏和胸腺组织未见明显变化，肝脏组织出现肝 小叶排列紊乱、炎症细胞浸润和大量空泡等现象，提示肝脏有变性性损伤。结论 家兔耳缘静脉注射SRBC 6周可导致Ⅱ型超敏反应。 关键词：超敏反应；模型，动物；绵羊红细胞 中图分类号：R965．1文献标志码：A l DoI：10．3867／j．issn．1000-3002．2010．020．01 超敏反应是指机体对某些抗原初次应答以后， 观察动物的体征、一般表现及免疫系统损伤等评价 再次接受相同抗原刺激时，发生的以机体功能紊乱 J，根据 资料中值得借鉴的观察Ⅱ型超敏反应的方法，该方 或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答u。2 redblood 超敏反应发生的速度、发病机制和临床特征，将超敏 法通过静脉注射绵羊红细胞(sheep cells， 反应分为I，Ⅱ，Ⅲ和Ⅳ型。目前，对I型超敏反应 SRBC)免疫家兔，取血清注射于豚鼠皮内组织，在补 的临床特征及发病机制研究已较深入，并根据其发 体参与下引起皮肤血管炎，使血管通透性增加，从而 病机制的不同环节设计建立了多种过敏试验方法。 引起Ⅱ型超敏反应旧J。该方法可用于药物抗Ⅱ型 然而，应用该类模型对中药注射液进行免疫毒理学 超敏反应的药效学研究。无法用于药物的免疫毒理 评价时。并不能覆盖所有的免疫毒性反应【3J，如临 学评价，因此有必要探索建立药物免疫毒性反应评 床应用葛根素注射液时曾引起急性溶血性贫血等严 价的动物模型。 重不良反应[4。】。经初步研究认为，葛根素注射剂 本研究借鉴Forssmam皮肤血管炎反应和I型 6 引起的急性溶血性贫血可能属于Ⅱ型超敏反应∞，。 超敏反应的部分步骤，家兔耳缘静脉注射SRBC 然而对于Ⅱ型超敏反应，目前尚无简单易行的动物 周，观察免疫系统相关症状、溶血、血细胞计数和肝 模型。根据中药和天然药物免疫毒性(过敏性和光 肾功能等可反映Ⅱ型超敏反应特征的相关指标，以 敏性)研究的技术指导原则，Ⅱ和Ⅲ型超敏反应可 期建立Ⅱ型超敏反应家兔模型，为免疫毒理学或药 在进行